الفهرس Only 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 186 |  |  |
| | | from | 186 | | |
Abstract
This study was carried out in the Medical Biochemistry department and Clinical Oncology and Internal Medicine outpatient clinics, Faculty of Medicine, Zagazig University. MAGE-1 m-RNA expression in blood and serum levels of VEGF and AFP were evaluated in a trial to assess their possible use as a diagnostic/or prognostic tool for HCV infection complications like cirrhosis and HCC.
This study comprised seventy-five individuals classified into five groups; control group (group I) which comprised fifteen apparently healthy volunteers, group II which involved fifteen HCV infected patients without any complications (cirrhosis), group III involved fifteen HCV infected patients complicated with cirrhosis, group IV included fifteen HCV infected patients complicated with cirrhosis and localized HCC and group V included fifteen HCV patients complicated with cirrhosis and metastatic HCC.
MAGE-1 m-RNA expression in blood and serum levels of VEGF and AFP were determined and the results were statistically analyzed revealing the following:
MAGE-1 m-RNA determination in blood by RT-PCR assay revealed 36.7 % (11 out of 30 HCC patient) were found to be positive for MAGE-1 in the peripheral blood samples. Detection of MAGE-1 transcript in PBMCs is closely correlated to the pathological stages of HCC. The more advanced stages of HCC, the higher rate of micro-metastasis of cancer cells detectable in peripheral blood and the higher frequency of positivity of MAGE-1 transcript among the group V (metastatic HCC) (60 %, 9 out of 15), while in the group IV (localized HCC), the positivity was (13.3 %, 2 out of 15) (with significant increase in group V than group IV; P< 0.05). Whereas, all samples from healthy volunteers and patients with hepatitis and cirrhosis were negative. These results indicate that MAGE-1 m-RNA is cancer-specific and could be detected in samples from patients with HCC (specificity=100%).
As regard the obtained results of serum VEGF, a significant increase was detected in localized HCC group as compared with cirrhosis group (P< 0.05). Also, a significant increase was detected in metastatic HCC group as compared with localized HCC, cirrhosis, hepatitis and healthy control groups (P< 0.001). No other significant differences were detected between the studied groups.
Concerning the obtained results of serum AFP, when localized and metastatic HCC groups were compared with cirrhosis, hepatitis and healthy controls ones, a significant increase was observed (P< 0.001), whereas a non significant difference was observed when they were compared with each other (P> 0.05). Also, a non significant difference was detected between cirrhosis and hepatitis groups (P> 0.05) but when they were compared with healthy control one, a significant increase of serum AFP was detected (P< 0.001).
Regarding the correlation matrix, a positive correlation between VEGF and AFP in all studied individuals (r=0.34, P< 0.01) and in hepatitis group (r=0.76, P< 0.01) were obtained, whereas non significant correlations were detected in healthy control and cirrhosis groups. In hepatoma groups, non significant correlations were detected between all studied parameters in localized or metastatic HCC groups.
In conclusion, detection of MAGE-1 m-RNA in blood and serum VEGF and AFP has different significances; As regard MAGE-1 m-RNA, it seems to be a parameter to detect occult hematogenous dissemination of HCC cells much earlier than any other means, So detection of MAGE-1 transcript in blood, especially with follow up, may help to prefigure HCC metastasis and monitor the response to the therapy. Concerning serum VEGF, our results suggest a possible role for serum VEGF as an indicator of the development of HCC in patients with liver cirrhosis during follow-up and the possibility to use it as an indicator to reflect the disease’s potential activity of vascular invasion and metastasis. In case of AFP, this parameter may represent a liver cell-specific marker, not a tumor-specific marker and our results suggest to use it as a supplementary marker which may help diagnosis of HCC, but not to detect circulating HCC cells, as it was elevated in large portion of patients with localized HCC. Therefore, combination of multiple markers may be more valuable in the diagnosis and prognosis of HCC.
Moreover, it was reported that, the expression of MAGE-1 gene, the tumor-specific marker, in HCC is more frequent than in various other cancers and several peptides of the MAGE-1 protein, which contain Major histocomptability (MHC) binding motifs and potential CTL (Cytotoxic T lymphocyte) epitopes were reported, so many HCC patients might be candidates for the specific immunotherapy. Furthermore, understanding of tumoral angiogenesis has dramatically increased and it is hopeful that numerous drugs are currently tested and becoming available in clinic as Bevacizumab (rhuMAb-VEGF) which is a humanized murine monoclonal antibody directed against VEGF, therefore inhibiting the key factor for angiogenesis in tumors and controlling tumor growth, so it may turn it from a deadly into a chronic disease. والعيادة الخارجية للأمراض المتوطنة - كلية الطب البشرى - جامعة الزقازيق. وقد تم تقييم تعبير الحامض النووى الريبوسى حامل الشفرة للجين (ماج-١) فى الدم و قياس مستويات عامل النمو البطانى الوعائى و الألفا فيتوبروتين فى مصل الدم كمحاولة لتقييم إمكانية إستخدامهم كدلالات كيميائية حيوية كامنة لتشخيص ومتابعة مضاعفات الإلتهاب الكبدى الفيروسى سى مثل تشمع الكبد و سرطان الكبد الخلوى.
وقد شملت هذه الدراسة خمسة وسبعين شخصاََََ و اعتمادا على الفحص المعملى والإشعاعى و الإكلينيكى تم تقسيمهم إلى خمس مجموعات كالآتى:
المجموعة الأولـــــى (الضابطة):
ضـــمت خمسة عشر من المتطوعين الأصحاء ويخلون تماما من أية أمراض قد تتعارض مع موضوع الدراسة وليس لديهم تاريخ مرضى حالى أو سابق لأمراض الكبد أو أورام خبيثة.
المجموعة الثانيــــــــــــــــــة:
احتـــوت على خمسة عشر مريضا مصابين بالإلتهاب الكبدى الفيروسى سى.
المجموعة الثالثــــــــــــــــــة:
اشـــتملت على خمسة عشر مريضا مصابين بالإلتهاب الكبدى الفيروسى سى ومضاعفاته (تشمع الكبد).
المجموعة الرابعــــــــــــــــــة:
احتـــوت على خمسة عشر مريضا مصابين بالإلتهاب الكبدى الفيروسى سى ومضاعفاته (تشمع الكبد و سرطان الكبد الخلوى المتمركز فى الكبد).
المجموعة الخامســـــــــــــــــة:
تكونـــت من خمسة عشر مريضا مصابين بالإلتهاب الكبدى الفيروسى سى ومضاعفاته (تشمع الكبد و سرطان الكبد الخلوى فى مرحلة النمو الإنبثاثى).
جميع الأشخاص الذين شملتهم الدراسة قد تم اختيارهم من متبرعى بنك الدم (المجموعة الضابطة) ومرضى الإلتهاب الكبدى الفيروسى سى المترددين على العيادة الخارجية لعلاج الأورام و العيادة الخارجية للأمراض المتوطنة (باقى المجموعات) وقد كانوا يخلون تماما من أية أمراض وبخاصة الأمراض الفيروسية الأخرى و الأورام الخبيثة غير سرطان الكبد الخلوى .
تم سحب وجمع عينات الدم وفصل خلايا الدم الخارجية وحيدة النواة لتقييم الحامض النووى الريبوسى حامل الشفرة للجين (ماج-١) وفصل المصل لقياس مستويات عامل النمو البطانى الوعائى و الألفا فيتوبروتين وقد تم تحليل النتائج إحصائيا.
أسفرت التحليلات الإحصائية لنتائج الحامض النووى الريبوسى حامل الشفرة للجين (ماج-١) عن تعبير إيجابى ذى دلالة معنوية له فى المجموعة الخامسة بالمقارنة بالمجموعة الرابعة. ولم يلاحظ أى تعبير له فى المجموعات الأخرى.
وفيما يتعلق بنتائج عامل النمو البطانى الوعائى فقد أسفر التحليل الإحصائى للنتائج عن وجود زيادة ذات مدلول معنوى فى مستوياته عند مرضى المجموعة الرابعة و الخامسة بالمقارنة بالمجموعة الثالثة و عند مرضى المجموعة الخامسة بالمقارنة بالمجموعة الرابعة.
بالنظر إلى نتائج الألفا فيتوبروتين فقد أوضحت الإختبارات الإحصائية عن وجود زيادة ذات دلالة معنوية فى مستوياته عند كل مجموعات المرضى مقارنة بالمجموعة الضابطة وعند مرضى المجموعة الرابعة بالمقارنة بالمجموعة الثالثة.
وتبين من التحليلات الإحصائية وجود علاقات طردية ذات دلالة معنوية بين عامل النمو البطانى الوعائى و الألفا فيتوبروتين و ذلك عند استخدام جميع الأشخاص الذين شملهم البحث وأيضا عند عمل العلاقات داخل المجموعة الثانية . و لم يلاحظ أى علاقات طردية ذات دلالة معنوية فى المجموعة الرابعة و الخامسة.
ومما سبق يمكن استخلاص أن تحديد تعبير الحامض النووى الريبوسى حامل الشفرة للجين (ماج-١) وتقييم مستويات عامل النمو البطانى الوعائى و الألفا فيتوبروتين لهم دلالات مختلفة. حيث أن تحديد تعبير الحامض النووى الريبوسى حامل الشفرة للجين (ماج-١) فى الدم من الممكن أن يساعد فى التكهن بتطور سرطان الكبد الخلوى و إنتشاره فى الدم و أيضا فى متابعة الإستجابة للعلاج. وفيما يخص تحديد مستوى عامل النمو البطانى الوعائى فى مصل الدم فمن الممكن استخدامه كإختبار يساعد فى تشخيص ومتابعة المرضى المصابين بسرطان الكبد الخلوى, فى حين تحديد مستوى الألفا فيتوبروتين فى مصل الدم فقد تبين من النتائج أنه يمكن استخدامه كإختبار تكميلى يساعد فى تشخيص المرضى المصابين بسرطان الكبد الخلوى حيث لوحظ إرتفاع مستواه فى بعض المرضى المصابين بسرطان الكبد الخلوى المتمركز فى الكبد. ولذلك فإن ضم الإختبارات الثلاثة من الممكن أن يكون أكثر نفعا فى تشخيص و متابعة سرطان الكبد الخلوى.