الفهرس يوجد فقط 14 صفحة متاحة للعرض العام
 |  | from | 244 |  |  |
| | | from | 244 | | |
المستخلص
النبق أو السدر أو ما يعرف بالجوجوبا الهندى يعتبر من الثمار الغنية بالسكر والفيتامينات وهو ما جعله من النباتات المهمة على مدى القرون الماضية .
النبق الطفرة أو ما يعرف بالنبق حزين اكتشف فى أواخر الخمسينات فى مزرعة خاصة تعرف بمزرعة الحاج هاشم عبد الله فى ساحل سليم – العفادرة - حيث ظهر فرع أوراقه تختلف عن أوراق النبق البلدى وتم نقل النبق الطفرة إلى مزرعة الفاكهة-كلية الزراعة- جامعة أسيوط أواخر الخمسينات حيث ُطعم على النبق البلدى .
يعتبر حفظ الأصول الوراثية مهما جداً لبقاء محاصيل الغذاء والعلف والتصنيع . وحتى وقت قريب كان الحفظ للأصول الوراثية يتم خضرياً عن طريق التطعيم أو العقل مما كان يتطلب مساحة كبيرة من الأرض ومقاومة الحشرات والأمراض والكوارث الطبيعية .
تطور علم زراعة الأنسجة معملياً أدى إلى تطور كبير فى حفظ الأصول الوراثية معملياً حيث أنه يتميز بصغر المساحة المتطلبة لحفظ الأصول الوراثية كما أنه يحميها من الإصابة بالحشرات والأمراض مما يؤدى لجودة المحاصيل النهائية .
من الطرق المستخدمة لحفظ الأصول الوراثية هى التبريد والتجميد والحفظ في النيتروجين السائل على -196°م والحفظ على بيئات مختلفة بتركيزات مختلفة (1/1 - 2/1 - 4/1 - 4/3 قوة البيئة) أو استخدام أنواع مختلفة وتركيزات مختلفة من السكر وأيضاً منظمات النمو . البذرة الصناعية مصطلح أطلق حديثاً فى علم زراعة الأنسجة ويسمى أيضاً ”كبسلة” حيث يوجد جنين (برعم) خضرى محاط بأندوسبرم صناعى وله غطاء من كلوريد الكالسيوم وتستخدم البذور الصناعية فى :
(1) إنتاج كمي سريع للسلالات باستخدام أقل مساحة ممكنة .
(2) إنتاج جنين خضري فى شكل كبسولات له القدرة على النمو والتفريع يسهل نقله بين المعامل المختلفة .
أهداف البحث :
(1) حفظ الأصول الوراثية للنبق معملياً باستخدام بيئات مختلفة بتركيزات مختلفة واستخدام أنواع مختلفة من السكر وأيضاً منظمات النمو .
(2) استخدام البذرة الصناعية فى النبق ومعرفة التركيز المناسب من الأوكسين اللازم لإنبات الجنين الخضرى من الكبسولات .
العمل التجريبى :
تمت الدراسة فى الفترة من 2003-2008 بمعمل زراعة الأنسجة بقسم البساتين (فاكهة) كلية الزراعة جامعة أسيوط باستخدام أفرع خضرية من النبق حزين المنزرع بمزرعة الفاكهة- كلية الزراعة – جامعة أسيوط .
1 – تجربة التخزين :
اشتملت هذه التجربة على ثلاث تجارب :
[1] تأثير البيئة على تخزين نبيتات نبق حزين لمدة سنة
استخدمت ثلاث أنواع من البيئات :
1- موراشيجي وسكوج بتركيز كامل .
2- موراشيجي وسكوج بنصف التركيز.
3- نيتش و نيتش بتركيز كامل
[2] تأثير نوع السكر على تخزين نبيتات نبق حزين لمدة سنة
استخدمت ثلاث أنواع من السكر :
1- سكروز 30 جم / لتر ( كنترول ) .
2- جلوكوز 30 جم / لتر .
3- سكروز 30 جم / لتر + مانيتول 30 جم / لتر .
[3] تأثير منظمات النمو على تخزين نبيتات نبق حزين لمدة سنة
1- حمض الأبسيسك بتركيز 7 و 9 مجم / لتر .
2- ثيويوريا بتركيز 2 و 4 مجم / لتر .
3- أندول حامض الخليك بتركيز 0.2 و 0.4 مجم / لتر .
القياسات :
تم تسجيل القياسات التالية كل ثلاثة أشهرخلال مدة التخزين:
• نسبة الحيوية : عدد النبيتات الخضراء .
• التفريع : عدد الأفرع لكل نبات .
• طول النبات (سـم) .
• عدد الأوراق لكل فرع .
• عدد العقد لكل فرع .
• طول وعرض الورقة(سـم)
– تجربة القدرة على إعادة النمو :
خلال التخزين لمدة سنة أخذت خمس برطمانات كل ثلاثة شهور من كل معاملة وتم إعادة زرعها على بيئة جديدة لاختبار قدرتها على إعادة النمو والتفريع وتم أخذ القياسات كالسابق مضافاً إليها الوزن الرطب والجاف بالجرام للنبيتات المزروعة .
2 – تجربة البذرة الصناعية :
فى هذه التجربة تـم أخذ العينات عن طريق القطع فوق البرعم وتحته بمسافة 2-4 سم ووضعها فى محلول مغذى يحتوى على بيئة الأملاح ومصدر سكر وفيتامينات وأكسين أندول حامض الخليك بالإضافة إلى 3% ألجينات صوديوم ثم توضع فى محلول كلوريد كالسيوم لتكون بمثابة الغطاء للبذور الصناعية .
- تم اختبار 4 أنواع من البيئات (بيئة موراشيجي وسكوج وبيئة نيتش و نيتش وبيئة جامبورج وبيئة النباتات الخشبية ) .
- تم اختبار أربع تركيزات من أكسين أندول حامض الخليك (صفر،0.5 ، 0.1 ، 0.5 ، 1 مجم/لتر) بعد 8 أسابيع كانت القياسات كالتالى :
• نسبة الحيوية : عدد النبيتات الخضراء .
• نسبة الأنبات : عدد البذور التى أنبتت لكل تركيز من الأوكسين .
• التفريع : عدد الأفرع لكل نبات .
• طول النبات (سـم) .
• عدد الأوراق لكل فرع .
• عدد العقد لكل فرع .
• طول وعرض الورقة(سـم)
وكانت أبرز النتائج كالتالى :
1- بالنسبة لتأثير نوع البيئة على تخزين وإعادة النمو لنبيتات نبق حزين الناتجة معملياً كانت بيئة موراشيجي وسكوج كاملة التركيز ونصف التركيز أحسن بيئات لحفظ نبيتات النبق لمدة 12 شهر فى حالة جيدة جداً بينما بيئة نيتش و نيتش كاملة التركيز استطاعت حفظ نبيتات النبق لمدة 9 شهور فقط حيث انخفضت الحيوية خلال 6 و 9 شهور بنسبة 13.82 و 14.89%علي التوالي . أما بيئة موراشيجي وسكوج بنصف التركيز كان النمو البطئ فيها نتيجة الزراعة على نصف تركيز الأملاح وكان متوسط أطوال النبيتات عند 3 شهور من التخزين2.24سم انخفضت بمعدل 32.14% عند 6 شهور من التخزين بينما عند 9 و 12 شهر من التخزين ارتفعت أطوال النبيتات بمعدل 0.89% مقارنة بثلاثة أشهر من التخزين . أما بالنسبة لبيئة موراشيجي وسكوج كاملة التركيز فان عدد الأوراق /فرع كان 7.36 ورقة بعد 3 شهور من التخزين . انخفض إلى 5.21 ورقة بعد 6 شهور بنسبة 29.21% وإزداد الانخفاض بعد 9 ، 12 شهر ليصل إلى 16.84 – 100% ،مقارنة بـ 3 شهور من التخزين علي التوالي .
عموماً بيئة موارشيجى وسكوج كاملة التركيز أعطت نباتات جيدة المظهر وصحية وذات لون جيد وأعطت أطول نبيتات أعلى من بيئة موراشيجي وسكوج نصف التركيز وبيئة نيتش و نيتش . كما أظهرت النتائج أن 9 شهور من التخزين أعطت نتائج أفضل من 6 ، 12 شهر من التخزين بالإضافة إلى أن بيئة موراشيجي وسكوج كاملة التركيز كانت الوحيدة القادرة على إعادة النمو لمدة 12 شهر فى شكل جيد و صحي . انخفضت أطوال النبيتات على بيئة موراشيجي وسكوج كاملة التركيز بعد 6 شهور من إعادة النمو بنسبة 28.57% بينما حتى 9 ، 12 شهر كان الانخفاض بنسبة 10.2 ، 38.77% مقارنة بـ 3 شهور من اعادة النمو علي التوالي . أما بالنسبة للوزن الرطب (جـم) فقد ارتفع فى بيئة موراشيجي وسكوج كاملة التركيز بنسبة 45.83% بينما فى 9 ، 12 شهر كان الانخفاض بنسبة 45.83 ، 70.83% علي التوالي . وعلى بيئة موراشيجي وسكوج نصف التركيز ارتفع الوزن الرطب بعد 6 شهور من إعادة النمو الى 40% مقارنة بـ 3 شهور من اعادة النمو. أما بالنسبة لبيئة نيتش و نيتش فإن الوزن الرطب انخفض بنسبة 5.88 ، 68.62% خلال 6 ، 9 شهور من إعادة النمو مقارنة بـ 3 شهور من اعادة النمو علي التوالي .
2- بالنسبة لتأثيرنوع السكر على تخزين وإعادة نمو نبيتات نبق حزين معملياً فإن استخدام الجلوكوز بتركيز 30 جم / لتر والسكروز بتركيز 30 جم / لتر ادى الى حفظ النبيتات لمدة 12 شهر بينما استخدام المانيتول بتركيز 30 جم/ لتر بإضافته مع السكروز 30 جم / لتر لم يستطع حفظ النبيتات مدة أطول من 9 شهور حيث انخفضت أطوال النبيتات عموماً فى هذه المرحلة مع هذه المعاملة على بيئة موراشيجي وسكوج بنصف التركيز ونيتش و نيتش. انخفضت أطوال النبيتات على الثلاث بيئات المضاف إليها جلوكوز بتركيز 30 جم / لتر خلال شهور التخزين بشكل بسيط وغير معنوى .
- قلل الجلوكوز بتركيز 3% من عدد الأوراق بعد 6 شهور من التخزين على بيئات موراشيجي وسكوج كاملة التركيز ونصف التركيز ونيتش و نيتش بنسبة 26.33 ، 58.33 ، 28.43% مقارنة بـ 3 شهور من اعادة النمو علي التوالي . بينما أدت معاملة المانيتول + السكروز بعد 6 شهور من التخزين إلى نقص معنوى فى عدد الأوراق بلغ 44.44 ، 40.45 ، 32% فى بيئات موراشيجي وسكوج كاملة التركيز ونصف التركيز ونيتش و نيتش علي التوالي .
- بالنسبة لصفة التفريع فإن معاملة السكروز بنسبة 3% أدت عموماً إلى زيادة عدد الفريعات خصوصاً فى بيئات موراشيجي كاملة التركيز ونيتش و نيتش بنسبة 40 ،14.28% علي التوالي .
- بالنسبة لتجربة إعادة النمو فإن معاملة الجلوكوز 3% حافظت على نسبة حيوية عالية طوال مرحلة إعادة النمو خصوصاً فى بيئة موراشيجي وسكوج كاملة التركيز ونصف التركيز بينما فى معاملة المانيتول + السكروز فأن إعادة النمو للنبيتات كان لمدة 9 شهور فقط فى الثلاث بيئات . أظهرت أطوال النبيتات فى معاملة الجلوكوز 3% عندما أضيف إلى بيئة موراشيجي كاملة التركيز ونيتش و نيتش انخفاضاًبلغ 10.8 ، 31.81% بعد 6 شهور من إعادة النمو, بينما أدت الي زيادة بلغت 127.7% فى بيئة موراشيجي وسكوج نصف التركيز خلال نفس الفترة مقارنة بـ 3 شهور من اعادة النمو.
- أيضاً أدى استخدام الجلوكوز بنسبة 3% إلى زيادة عدد الأوراق لكل فرع خصوصاً فى بيئة موراشيجي وسكوج كاملة التركيز بعد 9 شهور من إعادة النمو بزيادة 25.96% بينما انخفض عدد الأوراق / فرع فى بيئة موراشيجي وسكوج نصف التركيز ونيتش و نيتش بنسبة 5.8 ، 66.6% علي التوالي.أما فى صفة التفريع أدى الجلوكوزبتركيز 3% إلى زيادة نسبة التفريع فى بيئة موراشيجي وسكوج كاملة التركيزبعد 6 شهور من إعادة النمو و بلغت الزيادة 25% مقارنة بـ 3 شهور من اعادة النمو. بينما نقصت نسبة التفريع فى بيئة موراشيجي وسكوج نصف التركيز عند نفس المدة بنسبة 14.28% . أما السكروز فقد أدى عموماً إلى نقص نسبة التفريع خصوصاً عند 6 شهور من إعادة النمو بنسبة 25 ، 11.11% فى بيئات موراشيجي وسكوج كاملة التركيز ونصف التركيز وعند نفس المدة أدى أستخدام المانيتول بتركيز 3% بإضافته إلى السكروز إلى انخفاض معنوى فى عدد العقد / فرع بنسبة 83.33 و 55.55% فى بيئات موراشيجي وسكوج نصف التركيز ونيتش و نيتش بالمقارنة بـ 3 شهور من اعادة النمو. بينما أدى الجلوكوز 3% إلى زيادة عدد العقد / فرع بنسبة 36.6 و 221.8 و45.6% فى بيئات موراشيجي وسكوج كاملة التركيز ونصف التركيزو بيئة نيتش و نيتش عند 6 شهور من إعادة النمو بالمقارنة بـ 3 شهور من اعادة النمو . أما بالنسبة لطول وعرض الورقة (سـم) فإن المانيتول بتركيز 3% عند إضافته للسكروز بتركيز 3% أدى إلى نقص فى طول الورقة وعرضها فى بيئة نيتش و نيتش بنسبة 50 و 83.33% علي التوالي بعد 6 شهور من إعادة النمو مقارنة بـ 3 شهور من اعادة النمو.
- معاملة السكروز بتركيز 3% أدت إلى زيادة الوزن الرطب والجاف (جم) بعد 6 شهور من إعادة النمو مقارنة بـ 3 شهور من اعادة النموحيث أدت إلى زيادة الوزن الرطب فى بيئة موراشيجي وسكوج كاملة التركيز ونصف التركيز بنسبة 45.83 و 40% علي التوالي بينما أدت الي زيادة الوزن الجاف فى بيئة موارشيجى وسكوج كاملة التركيز ونصف التركيز ونيتش و نيتش بنسبة 66.67و 400 و 125% علي التوالي . بينما أدى أستخدام الجلوكوز إلى زيادة فى الوزن الرطب فى بيئة موراشيجي وسكوج نصف التركيز ونيتش و نيتش بنسبة 244.44 ، 366.67% علي التوالي عند 6 شهور من إعادة النمو و أدي أيضاً الجلوكوز 3% إلى زيادة الوزن الجاف للنبيتات (جم) عند نفس المدة فى بيئات موراشيجي وسكوج نصف التركيز ونيتش و نيتش ليصل الى 0.07 ، 0.02جم بينما أدت نفس المعاملة( 3% جلوكوز) عند 6 شهور من إعادة النمو الى تناقص الوزن الجاف للنبيتات فى بيئة موارشيجى وسكوج كاملة التركيز بنسبة 60%مقارنة بـ 3 شهور من اعادة النمو.
-عموماً فإن تجربة تأثير نوع السكر أظهرت بأن الجلوكوز أفضل مصدر للكربون مقارنة بالسكروز وحده أو مضافاً إليه المانيتول .
3- بالنسبة لتأثير منظمات النمو على تخزين وإعادة نمو نبيتات النبق حزين معملياً فقد وجد أن الثيويوريا كانت أفضل معاملة فى إعطاء أعلى نسب حياة خلال مدة التخزين بلغت كمتوسط فى الثلاث أنواع من البيئات 70% عند تركيز 2 مجم/ لتر ثيويوريا و 70.75% عند تركيز 4 مجم / لتر ثيويوريا.يلي ذلك حمض الأبسيسك بقيم متوسطة بين الثيويوريا وأندول حمض الخليك .أضف الي ذلك فان أندول حمض الخليك استطاع حفظ البيئات لمدة 9 شهور فقط فى الثلاث بيئات .
- بالنسبة لارتفاع النبيتات فإن استخدام الثيويوريا عند تركيز 2و4 مجم/ لتر فى بيئات موراشيجي وسكوج كاملة التركيز ونصف التركيز كان ثابت تقريبا طوال مدة التخزين مع حدوث انخفاض بسيط فى بيئة نيتش و نيتش . وأيضاً عند استخدام حمض الأبسيسك بتركيز 7 مجم / لتر فى بيئات موراشيجي وسكوج كاملة التركيز ونصف التركيز كان ارتفاع النبيتات ثابت بعد 6 أشهر من التخزين مقارنة بـ 3 شهور من التخزين وحدثت زيادة فى ارتفاع النبيتات عند 9 و 12 شهر فى بيئات موراشيجي وسكوج كاملة التركيز ونصف التركيز مقارنة بـ 3 شهور من التخزين بينما عند استخدام تركيز 9 مجم / لتر حمض الأبسيسك حدث نقص معنوى فى أطوال النبيتات بنسبة 47.88% بعد 12 شهر من التخزين فى بيئة موارشيجى وسكوج كاملة التركيز مقارنة بـ 3 شهور من التخزين .
- بالنسبة لعدد الأوراق بعد 12 شهر من التخزين فان استخدام الثيويوريا بتركيز 2 مجم / لتر فى بيئات موراشيجي وسكوج كاملة التركيز ونيتش و نيتش أدي الى حدوث نقص في عددها بلغ 72.8 ، 46.53% علي التوالي مقارنة بـ 3 شهور من التخزين. بينما استخدام الثيويوريا بتركيز 4 مجم / لتر أدي الى إبقاء عدد الأوراق ثابت طوال مدة التخزين (12 شهر) على الثلاث بيئات، بينما حافظ أندول حمض الخليك على الأوراق لمدة 9 شهور فقط من التخزين. بالنسبة للتفريع فإن حمض الأبسيسك أعطى أقل نسبة تفريع طوال فترة التخزين .
- أما بالنسبة لتجربة إعادة النمو فإن الثيويوريا أعطت أفضل نسبة حياه للثلاث بيئات بمتوسط 61.76% عند تركيز 2 مجم / لتر و نسبة 72% عند تركيز 4 مجم / لتر . أما حمض الأبسيسك فقد أستطاع أن يعيد نمو النبيتات بصورة جيدة و استعادة اللون الأخضر مرة أخرى (خصوصاً فى بيئة نيتش و نيتش ) . تركيز 2 مجم / لتر من الثيويوريا استطاع الحفاظ على أوراق النبيتات بعد 12 شهر من اعادة النمو فى بيئة موراشيجي وسكوج كاملة التركيز بزيادة تقدر 5.26% مقارنة بـ 3 شهور من إعادة النمو وبيئة نيتش و نيتش بنقص معنوى بلغ 35.48% مقارنة بـ 3 شهور من إعادة النمو. بينما الثيويوريا عند 4 مجم / لتر لم تستطع إبقاء الأوراق طوال فترة إعادة النمو (12 شهر) إلا فى بيئة موراشيجي وسكوج كاملة التركيز .
أما بالنسبة لحمض الأبسيسك فإن تركيز 7 مجم / لتر أدى إلى زيادة معنوية بلغت 23.02 ، 100% فى عدد الأوراق / فرع فى بيئة موراشيجي وسكوج كاملة التركيز ونصف التركيز علي التوالي بعد 12 شهر من اعادة النمو مقارنة بـ 3 شهور من إعادة النمو.
بالنسبة لصفة التفريع فإن الثيويوريا بتركيز 2 مجم / لتر بعد 12 شهر من إعادة النمو أدت إلى انخفاض نسبة التفريع فى بيئات موراشيجي وسكوج كاملة التركيز ونيتش و نيتش بنسبة 50 ، 66.67% علي التوالي مقارنة بـ 3 شهور من إعادة النمو.و إزداد عدد الأفرع / نبات عند تركيز 7 مجم / لتر حمض الأبسيسك فى بيئات موراشيجي وسكوج كاملة التركيز ونصف التركيز عند 12 شهر من اعادة النمو بنسبة 100% لكليهما مقارنة بـ 3 شهور من إعادة النمو.
الوزن الرطب (جم) للنبيتات زاد بنسبة 89.13 ، 416.67% فى بيئات موراشيجي وسكوج كاملة التركيز ونيتش و نيتش بعد 6 شهور من إعادة النمو عند تركيز 2 مجم / لتر بينما عند نفس المدة فإن الثيويوريا بتركيز 4 مجم / لترأدى الى زيادة الوزن الرطب لبيئة موراشيجي وسكوج كاملة التركيز بنسبة 110% مقارنة بـ 3 شهور من إعادة النمو.
أيضاً فان تركيز 7 مجم / لتر حمض الأبسيسك أدى إلى زيادة الوزن الرطب بنسبة 240 ، 200 ، 200% لبيئات موراشيجي وسكوج كاملة التركيز ونصف التركيز ونيتش و نيتش علي التوالي عند 12 شهر من أعادة النمو مقارنة بـ 3 شهور من إعادة النمو .
4- بالنسبة للبذور الصناعية وجد أن تركيز 0.1 مجم / لتر أندول حمض الخليك أعطى أفضل إنبات ( 86.67% ) يليه تركيز 0.5 مجم/ لتر أندول حمض الخليك بنسبة 3.33%.
5- بالنسبة لنوع البيئة فى البذور الصناعية فإن بيئة موارشيجى وسكوج أعطت أفضل نسبة إنبات وأعلى أطوال للنبيتات ( سم ) وأكثر عدد أوراق وعدد عقد / فرع بالمقارنة ببيئات نيتش و نيتش وجامبورج و بيئة النباتات الخشبية .
توصى نتائج الرسالة بأنه للوصول لأطول فترة حفظ مع أفضل خصائص خضرية يمكن استخدام بيئة موراشيجي وسكوج MS بكامل تركيز الأملاح أو نصف تركيز الأملاح مع الجلوكوز 3% كمصدر كربونى. كما يمكن استخدام بيئة موراشيجي وسكوج MS بكامل تركيز الأملاح مع الثيويوريا 4 مجم / لتر ( أو حمض الأبسيسك 7 مجم ) . فى حين أن بيئة MS مع 0.1 مجم / لتر أندول حمض الخليك أعطت أفضل إنبات وخصائص خضرية للبذور الصناعية للطفرة نبق حزين .