الفهرس 
INTRODUCTIONOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 202 |  |  |
| | | from | 202 | | |
Abstract
تشمل العائلة التوتية حوالى55 جنسا و 1400 نوعا من النباتات المنتشرة فى المناطق المعتدلة و جنس الفيكس (التين) أكبر أجناس هذه العائلة ونباتاته معروفة من قديم الزمان وقد ورد ذكرها فى القرآن الكريم فى سورة التين : بسم الله الرحمن الرحيم ” والتين والزيتون وطور سينين وهذا البلد الأمين” صدق الله العظيم.
ويعتبر جنس مورس (التوت) أصغر أجناس العائلة التوتية. وترجع أهمية الفيكس (التين) والمورس (التوت) من الناحية الطبية إلى إستعمال خلاصتها المائية كخافض لمستوى السكر فى الدم وعلاجا˝ للكحة والإسهال، كما أن الجميز يستعمل فى علاج بعض الأمراض الجلدية هذا فضلا˝ عن أن بعض الأنواع تؤكل ثمارها مثل فيكس سيقومورس لينيه (الجميز) وأيضا˝ التوت الأبيض و الأسود.
وقد اشتملت هذه الدراسة على الأتى:
الجزء الأول: التوصيف الجينى وتعيين بعض الثوابت الدستورية لأوراق النباتين: فيكس بلاتيبودا وفيكس ليراتا
الجزء الثانى : دراسة فيتوكيميائية مقارنة لأوراق النباتين: فيكس بلاتيبودا و فيكس ليراتا
الجزء الثالُث : دراسة بيولوجية للمستخلص الكحولى المائى لأوراق فيكس بلاتيبودا وفيكس ليراتا.
الجزء الأول: توصيف الحمض النووى لكل من فيكس بلاتيبودا و فيكس ليراتا.
تم مضاعفة الحمض النووى المستخلص من كل من النباتين بواسطة تفاعل إنزيم البلمرة التسلسلىPCR) ) واستخدام إحدى عشرمن الدلائل عديدة النيكليوتيدات لتقييم الإختلاف الجينى بينهما. تم إستخدام هذه البوادىء بنجاح لتكوين قطع من الجينوم ذات بصمة مميزة للنباتين وذلك لمعرفة مدى التباين الجينى بينهما.
أوضحت دراسة البصمة الوراثية للنباتين وجود اثنين من الدلائل وهما OPA-09 OPM-05, يمكن استعمالها للتفرقة بين هذين النوعين من جنس فيكس وذلك بتسجيلهما أقل قيمة لمعامل التشابه الجينى.
الجزء الثانى: دراسة فيتوكيميائية مقارنة
الفصل الأول: المسح الكيميائى الأولى
ويشتمل هذا الفصل على مسح كيميائى أولى مقارن لأوراق وسيقان النباتين محل البحث وهما فيكس بلاتيبودا و فيكس ليراتا من حيث وجود الأنواع المختلفة من نواتج الأيض الثانوية .
أسفر المسح الكيميائى الأولى عن:
1. وجود كلا من: المواد الكربوهيدراتية و/ أو الجلوكوزيدات والفلافونيدات الحرة و /أو المقترنة والاستيرولات و /أو التربينات الثلاثية وكذلك العفصيات فى أوراق كل من النباتين، ولكنها وجدت بكميات قليلة فى السيقان . كما وجدت الكومارينات بكمية قليلة فى الأوراق فقط.
2. ومن الناحية الأخرى، وجد أن كل العينات التى تم اختبارها خالية من المكونات المتسامية والمواد الطيارة والصابونينات والقلويدات و /أو القواعد النيتروجينية والأنثراكينونات والجلوكوزيدات القلبية.
الفصل الثانى: تعيين بعض الثوابت الدستورية لأوراق النباتين
تم تعيين بعض الثوابت الدستورية لأوراق النباتين ومنها نسبة الرطوبة و الرماد الكلى و الرماد القابل للذوبان فى الماء وكذلك الرماد الغير قابل للذوبان فى الحمض و الألياف الخام .وقد وجد أن نسبة الرماد الكلى وكذلك الرماد الذى لا يذوب فى الحمض لنبات فيكس ليراتا أعلى من فيكس بلاتيبودا أما نسبة الرماد الذى يذوب فى الماء و نسبة الرطوبة وكذلك الألياف الخام فهى متقاربة فى النباتين
الفصل الثالث: إستخلاص الأوراق بالمذيبات المختلفة وإختبار الخلاصات
تم استخدام مسحوق أوراق فيكس بلاتيبودا و فيكس ليراتا (2 كجم من كل منهما) حيث تم إستخلاصها باستخدام كل من ن.هيكسان و ثنائى كلوريد المثيلين و خلات الإيثيل و ميثانول على التوالى .تم وزن الخلاصات الخالية من المذيب وتحديد نسبتها وتسجيل الخواص الطبيعية لها ثم بعد ذلك تم إختبار الخلاصات من حيث وجود المكونات المختلفة . وقد تم عمل مسح كروماتوجرافي لكل من الخلاصات الأربعة بإستخدام كروماتوجرافيا الطبقة الرقيقة على ألواح السيليكاجيل ومن هذه الدراسة يمكن إستنتاج التالى:
1. تشابه الخلاصات المختلفة لأوراق النباتين فى الخواص الطبيعية.
2. تم رصد النسبة المحصلة للخلاصات المتعاقبة للأوراق فى كلا النوعين.
3. الاستيرولات و /أو التربينات الثلاثية شكلت معظم مكونات خلاصة الهكسان وثنائى كلوريد المثيلين بإضافة إلى القليل من الفلافونيدات فى خلاصة ثنائى كلوريد المثيلين ومن الناحية الأخرى سادت مركبات عديدة الفينولات فى خلاصات خلات الإيثيل.
4. إعتماداعلى الوصف الكروماتوجرافى تم اختيار خلاصات ن.هكسان و خلات الإيثيل لأوراق نبات فيكس بلاتيبودا وخلاصة ثنائى كلوريد المثيلين لأوراق نبات فيكس ليراتا لفصل مكوناتها.
الفصل الرابع: فحص خلاصة ن. الهكسان
أ. التحليل بإستخدام كروماتوجرافيا الغاز- السائل: تم تجزئة مستخلص ن. الهكسان إلى مواد غير قابلة للتصبن ومواد متصبنة وقد تم تحليل كل منها على حدة بواسطة كروماتوجرافيا الغاز- السائل.
1. تحليل المواد غير المتصبنة
أظهرت نتائج تحليل كروماتوجرافيا الغاز- السائل اختلافات فى المحتوى الهيدروكربونى والإستيرولى لأوراق النباتين على النحو التالى:
• وجد أن عدد المكونات التى تم التعرف عليها فى أوراق نبات فيكس بلاتيبودا هو الأعلى (15) مقارنة بأوراق نبات فيكس ليراتا (11).
• مُثلت كمية المواد الكلية المتعرف عليها نسبة أعلى (82.1%) فى أوراق نبات فيكس ليراتا عنها فى أوراق نبات فيكس بلاتيبودا (66.29%).
• بلغت نسبة الاستيرولات الموجودة فيكس ليراتا (26.37% ) نسبة أعلى منها فى فيكس بلاتيبودا (12.49 %). و قد كان مركب البيتا سيتوستيرول هو الأعلى فى كلا النباتين (4.07 و5.96 % على الترتيب).
• بالنسبة للمواد ثلاثية التربين، كان البايكادينان هو المركب الوحيد الموجود فى كلا النباتين بنسبة (1.3 و 17.16% على الترتيب).
• بالنسبة للهيدروكربونات، كان ال ن- دوكوسان هو الأعلى (21.69%) فى نبات فيكس بلاتيبودا. أما ال ن-هيبتاكوسان هو الأعلى (33.77 %) فى نبات فيكس ليراتا.
2. تحليل الإسترات الميثيلية للأحماض الدهنية
أظهرت تحاليل كروماتوجرافيا الغاز- السائل للأحماض الدهنية لنباتى فيكس بلاتيبودا و فيكس ليراتا إختلافا كميا و نوعيا فى المكونات المتعرف عليها.
• مُثلت كمية المواد الكلية المتعرف عليها نسبة أعلى ( 97.46%) فى أوراق نبات فيكس ليراتا عنها فى أوراق نبات فيكس بلاتيبودا (84.05%).
• وكان حمض البالميتيك (22.07 %)هو الحمض الدهنى المشبع الرئيسى فى أوراق فيكس بلاتيبودا بينما حمض الكاربوسيريك (35.72 %)هو الحمض الدهنى المشبع الرئيسى فى أوراق فيكس ليراتا.
• ووجد أن حمض اللينوليك هو الحمض الدهنى الغيرالمشبع الرئيسى فى النباتين حيث بلغت نسبته 18.66% فى أوراق فيكس بلاتيبودا بينما بلغت 16.7% فى أوراق فيكس ليراتا ,وقد وجد حمض اللينولينك فقط فى أوراق فيكس بلاتيبودا.
ب. فصل المركبات الموجودة فى الجزء الغير متصبن لخلاصة الهكسان لأوراق فيكس بلاتيبودا:
1. تم فحص الجزء غير المتصبن لخلاصة ن-هكسان لأوراق نبات فيكس بلاتيبودا وكذلك نبات فيكس ليراتا باستخدام كروماتوجرافيا الطبقة الرقيقة . وأسفر الفحص عن وجود أكبر عدد من المركبات التى تتفاعل إيجابياً مع البارانيزالدهيد فى أوراق فيكس بلاتيبودا. وقد وجد أنها تحتوى على أربع مركبات رئيسية .
2. تم فصل هذه المركبات عن طريق تجزئة الجزء غير المتصبن على عمود من السيليكا باستعمال مذيبات الهكسان ، ثنائى كلوريد المثيلين ، خلات الايثيل منفردة أو ممزوجة بنسب متدرجة القطبية وأسفرت الدراسة عن فصل أربع مركبات وهما ألفا أميرين، بيتا أميرين ألفا- سبيناستيرول و بيتا- سيتوستيرول.
وقد تم التعرف على المركبات المفصولة عن طريق فحصها بواسطة الخصائص الطبيعية و الطيفية المختلفة والمقارنة بعينات قياسية.
الفصل الخامس: فحص خلاصة ثنائى كلوريد المثيلين لنبات فيكس ليراتا
• تم فحص مستخلص ثنائى كلوريد المثيلين لأوراق نبات فيكس بلاتيبودا وكذلك نبات فيكس ليراتا باستعمال كروماتوجرافيا الطبقة الرقيقة . وأسفر الفحص عن وجود عدد أكبر من المركبات التى تتفاعل إيجابياً مع البارانيزالدهيد فى أوراق فيكس ليراتا. ولذلك تم إختيار خلاصة نبات فيكس ليراتا لفصل المركبات.
• طريقة الفصل : تم تجزئة مستخلص ثنائى كلوريد المثيلين لنبات الفيكس ليراتا باستعمال كروماتوجرافيا العمود المعبأ بسيليكا باستعمال مذيبات ثنائى كلوريد المثيلين و الكحول الميثيلى بنسب متدرجة القطبية. وأسفرت هذه الدراسة عن فصل مركبين وقد تم التعرف عليهما بفحصهما طيفياً باستعمال الأشعة فوق البنفسجية فى وجود بعض الكواشف وباستعمال الوسائل الطيفية المختلفة ومقارنتها بعينات أصلية وبالنتائج المنشورة عن المركبين وهما كويرسيتين و بيتا- سيتو سيترول جلوكوزيد.
الفصل السادس: فحص خلاصة خلات الإيثيل لنبات فيكس بلاتيبودا
• فحص مستخلص خلات الإيثيل لكل من النباتين باستعمال كروماتوجرافيا الطبقة الرقيقة . وأسفر الفحص عن وجود عدد اكبر من المركبات فى نبات فيكس بلاتيبودا ولذلك تم إختيار خلاصة نبات فيكس بلاتيبودا لفصل المركبات.
• طريقة الفصل :تم تجزئة مستخلص خلات الإيثيل لنبات فيكس بلاتيبودا باستعمال كروماتوجرافيا العمود المعبأ بسيليكا باستعمال مذيبات ثنائى كلوريد المثيلين و الكحول الميثيلى بنسب متدرجة القطبية وتم فحص الأجزاء المجمعة من العمود باستخدام كروماتوجرافيا الطبقة الرقيقة. ثم تجميع الأجزاء المتشابهة ووضعها مرة اخرى على عمود كروماتوجرافيا المعبأ بسيفاديكس. وأسفرت هذه الدراسة عن فصل أربع مركبات وقد تم التعرف على المواد المفصولة بفحصها طيفياً باستعمال الأشعة فوق البنفسجية فى وجود بعض الكواشف وباستعمال الوسائل الطيفية المختلفة وهى :
[4-(3-acetoxy-2-hydroxypropoxy)-3-hydroxybenzoic acid] • Compound C7 .....................................
كمفيرول- 3 جلوكوزيد .................................. • Compound C8 (kaempferol 3-O- glucoside)
كويرسيترين ...................................................... • Compound C9 (quercitrin)
روتين ............................................................. • Compound C10 (rutin)
المركب C7 تم فصله فى هذه الدراسة لأول مرة من الطبيعة بينما المركبات الثلاثة الأخرى وهى كمفيرول 3 جلوكوزيد و كويرسيترين و روتين تم فصلها لأول مرة من نبات فيكس بلاتيبودا.
الفصل السابع: تعيين المحتوى الكمى للمواد الفينولية الموجودة فى خلاصة خلات الإيثيل لنبات فيكس بلاتيبودا
وذلك باستخدام كروماتوجرافبا السائل ذات الأداء العالى و قد وجد أن أوراق فيكس بلاتيبودا تحتوى على نسبة أعلى من المركب C7 عنها من المركبات الثلاثة الأخرى.
الجزء الثالُث : دراسة بيولوجية للمستخلص الكحولى المائى لأوراق فيكس بلاتيبودا و فيكس ليراتا.
1. دراسة التأثير السمي للمستخلص الكحولى80 % لأوراق نبات فيكس بلاتيبودا و فيكس ليراتا علي حيوانات التجارب :
أوضحت دراسة السمية الحادة فى فئران التجارب لكل من أوراق النباتين موضوع الدراسة للمستخلصات الكحولية (80 %) على أن المستخلصات آمنة حتى 2 جم/كجم من وزن الجسم ولا توجد أي أعراض للسمية وهى غير قاتلة حتى خمسة عشر يوماً.
تم أخذ عينات من الدم لتقدير نسبة الهيموجلوبين ، عدد كرات الدم الحمراء وعدد كرات الدم البيضاء . وأسفرت التحاليل على عدم ملاحظة اى اختلاف فى النتائج .
استناداً على النتائج السابقة، تم تحديد الجرعات التى ستستخدم فى الدراسات البيولوجية وهى 200 ، 400 مجم/كجم من وزن الجسم وهما يمثلان 1/10 ، 1/5 من أقصى إذابة للمستخلص فى 1مللى من الماء والتى لا تسبب القتل فى الفئران.
2. دراسة تأثير المستخلص الكحولى80 % لأوراق فيكس بلاتيبودا و فيكس ليراتا كخافضة لنسبة السكر فى الدم:
تم تقييم النشاط الخافض لنسبة السكر فى الدم لمستخلص الكحول الاثيلي 80 % لأوراق نباتي فيكس بلاتيبودا و فيكس ليراتا فى الفئران المصابة بارتفاع فى مستوى السكر عن طريق قياس مستوى الجلوكوز.
وقد اظهرت النتائج ان مستخلص الكحول الاثيلي 80 % لأوراق نبات فيكس بلاتيبودا أحدث نشاط (107.9± 5.817 و 64.11± 4.358) عند الجرعات المختبرة (200 و 400 مجم/كجم/يوميا) على التوالى أعلى من مستخلص أوراق نبات فيكس ليراتا( 127.2±4.359 و 127.7±6.889).
3. دراسة تأثير المستخلص الكحولى 80 % لأوراق فيكس بلاتيبودا و فيكس ليراتا كمضاد للأكسدة:
أسفرت نتائج تجربة (DPPH) المضادة للأكسدة لكل من المستخلصات الكحولية 80 % الكلية للنباتين موضوع الدراسة على أن نبات فيكس بلاتيبودا أفضل من فيكس ليراتا كمضاد للأكسدة وأن التركيزات المؤثرة فى 50 % (EC50) هى 232.6 ، 790.9 ميكروجرام /مل على التوالى.
4. دراسة تأثير المستخلص الكحولى 80 % لأوراق فيكس بلاتيبودا و فيكس ليراتا كمضاد للميكروبات.
قد أثبتت الدراسة أن جميع الخلاصات التى تم إختبارها ليس لها تأثير أو لها تأثير ضعيف ضد جميع أنواع البكتيريا والفطريات التى تم إستعمالها فى الدراسة.