الفهرس 
INTRODUCTIONOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 139 |  |  |
| | | from | 139 | | |
Abstract
هناك حاجة ملحة للتوصل لعوامل مضادات ميكروبية جديدة لها اقل اثار جانبية على جسم الانسان و تعتبر مجموعة انزيمات الهيستيدين كينيز جزء اساسى من مكون التركيب الثنائى الذى يتميز بعدم وجوده فى الخلايا الثديية وبالتالى تعتبر هذه المجموعة اهداف مثالية لاستحداث عوامل مضادات ميكروبية جديدة.
بروتين ال”CaNik1p” ينتمى الى المجموعة الثالثة من مجموعة انزيمات الهيستيدين كينيز الفطرية و هو موجود فى فطر الكانديدا البيكانس الذى يعد من اكثر مسببات العدوى الفطرية للانسان.
وقد تم اظهار دور هذه المجموعة لفاعلية العديد من مضادات الفطريات فى العديد من الدراسات بعد التحويل الوراثى للسكارومايسيس سرفيسيا ببروتين ال”CaNik1p” او اى من افراد هذه المجموعة والتى كانت مصحوبة بفسفرة بروتين ال”Hog1p” الذى يعتبر بروتين كينيز منشط بالمايتوجين ، حيث اصبحت الخميرة المتحولة وراثيا باى من اعضاء هذه المجموعة حساسة للعديد من مضادات الفطريات التى كانت مقاومة لها قبل التحول الوراثى. لكن على الرغم من النتائج التى اظهرتها هذه الدراسات فإن طريقة عمل مضادات الفطريات لا تزال غير مفهومة، كما انه لم يثبت عمليا ما اذا كانت هذه المجموعة هدف مباشر او غير مباشر لهذه المضادات.
وقد استطعنا فى هذه الدراسة ، و للمرة الاولى، اظهار التفاعل المباشر بين بروتين ”CaNik1p” كعضو بهذه المجموعة ومركب الفلودايوكسونيل كمثال لهذه المضادات عن طريق الرنين النووى المغناطيسى.
لدراسة اهمية المناطق المختلفة ببروتين ال”CaNik1p” فى فاعلية مضادات الفطريات تم عمل تحويل وراثى للسكارومايسيس سرفيسيا بالبروتين بعد استحداث العديد من الطفرات النقطية فى المناطق المختلفة للبروتين كل على حدة و قد شملت هذه الطفرات المنطقة المحتوية على الهيستدين المستقبل لمجموعة الفوسفات (هيستيدين٥۱۰) و المنطقة المسئولة عن الاتحاد مع جزئ الادينوسين ثلاثى الفوسفات بالاضافة الى المنطقة المستقبلة لمجموعة الفوسفات من الهيستيدين الى حامض الأسبارتيك (حامض الأسبارتيك۹۲٤). و قد لوحظ ان جميع سلالات السكارومايسيس سرفيسيا المتحولة وراثيا ببروتين ال”CaNik1p” ذات الطفرات المستحدثة اصبحت مقاومة لمضادات الفطريات المستخدمة فى هذه الدراسة بالمقارنة بتلك المتحولة وراثيا بالنموذج البرى من البروتين مما يشير الى دور هذه المناطق المختلفة فى الابقاء على ميكانكية عمل هذه المضادات و التى كانت مصحوبة بانعدام فسفرة بروتين ال”Hog1p” بعد معالجة هذه السلالات بمركب الفلودايوكسونيل. لكن على غير المتوقع لم يظهر اى تأثير لمركب الفلودايوكسونيل على النشاط الكينيزى الخارجى للبروتين المنقى.
تتميز المجموعة الثالثة من مجموعة انزيمات الهيستيدين الفطرية بوجود اجزاء مكررة من الأحماض الأمينية تسمى مناطق الهامب التى مازال دورها فى عمل هذه المجموعة غير واضح وقد تم استحداث فقد طفرى لجميع هذه المناطق فى بروتين ال”CaNik1p” متبوعة بالتحول الوراثى فى السكارومايسيس سرفيسيا بهذا الشكل الطفرى من البروتين. و قد لوحظ ان الابانة المغايرة لهذه الصورة الطفرية من البروتين فى السكارومايسيس سرفيسيا كانت مصحوبة بتثبيط كامل للنمو فى السكارومايسيس المتحولة وراثيا التى امكن ارجاعها لنموها الطبيعى اما بعد الاستحداث الاضافى لطفرة نقطية فى الحمض الامينى هيستيدين٥۱۰ او بالتحويل الوراثى فى السكارومايسيس المطفرة فى جين ال”SSK1” او جين ”HOG”.
وقد حاولنا فى هذه الدراسة ان ننقل هذه الطفرات الى فطر الكانديدا البيكانس لكنها احتاجت العديد من التجارب التى لم يتسنى استكمالها فى هذه الدراسة ولذلك فاننا نوصى باستكمال هذه المحاولات فى دراسات لاحقة.
مما سبق يمكننا ان نستخلص ان المعالجة بمضادات الفطريات او الفقد الطفرى لمنطقة الهامب فى السكارومايسيس سرفيسيا المتحولة وراثيا ببروتين ال”CaNik1p” كان مصحوبا بتثبيط للنمو.