Search In this Thesis
   Search In this Thesis  
العنوان
In vitro comparison between mesenchymal stem Cell derived from human adipose tissue and amniotic fluid /
المؤلف
EL-Sayyad, Omnia Khairi Radwan Ali.
هيئة الاعداد
باحث / أمنية خيرى رضوان على الصياد
مشرف / سعاد أحمد خليفة سعد
مشرف / محمد أحمد صبح
مشرف / إيمان حلمى محفوظ بكر
الموضوع
Stem cells. Mesenchymal stem cells. Amniocentesis. Amniotic liquid - Analysis. Adipose Tissue - cytology. Adipose tissues.
تاريخ النشر
2014.
عدد الصفحات
178 p. :
اللغة
الإنجليزية
الدرجة
ماجستير
التخصص
علم الحيوان والطب البيطري
تاريخ الإجازة
01/01/2014
مكان الإجازة
جامعة المنصورة - كلية العلوم - Zoology Department
الفهرس
Only 14 pages are availabe for public view

from 41

from 41

Abstract

تتكون خلايا الجذعية النسيج الدهني أو الدهون من نسيج قليل التماسك من الخلايا الدهنية. الدور الأساسي للدهون هو تخزين الطاقة. ولقد تم الكشف مؤخراً عن امكانية استخلاص الخلايا الجذعية الدهنية أثناء خضوع الأشخاص البالغين لعملية شفط الدهون. أما الخلايا الجذعية الجنينية فلها القدرة على الانقسام غير المحدود وكذلك تم التوصل الى وجود العديد من الخلايا الجذعية فى السائل الامنيونى أيضا.و تعتبر الخلايا الجذعية بسبب قدرتها الانقسامية اللامحدودة وتعدد خياراتها مصدرا هاما للعديد من الاستخدامات في مجال الطب. ونظرا لما تم الاشارة اليه فلقد تم اعداد الدراسة لتقييم استخلاص الخلايا الجذعية من الدهون المستخلصة من جراحات التجميل أو خلايا السائل الأمنيونى لدراسة مقدرتها على التمايز الى خلايا دهنية وعظمية وغضروفية ولقد تم استعراض النتائج على النحو التالى: أولا: فحوص التدفق الخلوى للخلايا الجذعية فى الدهون وخلايا السائل الأمنيونى: أوضحت الدراسة أن خلايا الدهون والسائل الأمنيونى تحتوى غلى العديد من الخلايا الجذعية وذلك بعد فحوص التدفق الخلوى للعديد من دلالات بروتين أسطح الخلايا والتى كانت ايجابية لل CD مثل CD13, CD29, CD105 , CD90 وسلبية لكل من CD34, CD14 كما تميزت خلايا السائل الأمنيونى بدلالة خلويه أخرى الا وهى Oct4. ثانيا: تمايز الخلايا الجذعية الدهنية من الدهون وخلايا السائل الأمنيونى: تم عزل الخلايا الدهنية وخلايا السائل الأمنيونى وزراعتها بوسط غذائى غير متخصص لمدة خمسة عشر يوما لعزل الخلايا قبل اجراء الدراسة عليها.ثم تم عزل الخلايا وزراعتها على وسط غذائى محفز لنمو الخلايا الدهنية واجراء فحص لتكوينها بعد 4 و7 و14 و 21 يوم. أوضحت الدراسة أن معدل تمايز ونمو الخلايا الجذعية المشتقه من السائل الأمنيونى أكثر وضوحا وانتشارا فى الوسط الغذائى. ولقد أخذت الخلايا شكلا مغزليا أقرب للخلايا الليفية بعد أربعة أيام . أما بعد أسبوع فلقد تجمعت الخلايا فى شكل تجمعات ذات عقدة مركزيه وبعضا منه أخذ شكلا بيضاويا بعد أربعة عشر يوما ويتضح خصائصها باستخدام الصبغ الدهنى oil red O مظهرة لونا أحمرا دالا على تكوين حبيبات دهنية فى سيتوبلازم تلك الخلايا الجذعية. ويمكن ملاحظة الحبيبات الدهنية في الخلايا الجذعية الدهنية المتمايزة سواء من النسيج الدهنى أو خلايا السائل الأمنيونى. وبفحص الخلايا بعد 21 يوما من الزرع والحث بالوسط الغذائى الدهنى يظهر التمايز الخلوى وتوزيع الكروماتين المتباين والحقيقى فى أنويتها وانتشار السبحيات والشبكة الاندوبلازمية والحبيبات الدهنية فى سيتوبلازم خلاياها. وكذلك لوحظ انتشار الحلمات على غشائها الخلوى. ثالثا: فحص للدلالات الجينية لللخلايا الجذعية الدهنيه المشتقة من الدهون أو خلايا السائل الأمنيونى: استخدم خمس دلالات جينية مثل الأديبوسيت-الأديبونيكتين-الليبتين- البيروكسيسوم المتمايز والمنشط للمستقبل جاما والليبوبروتين ليباز. ولقد تم عزل التعبير الجينى الأديبوسيت عند 280 جزئ -الأديبونيكتن 100 -الليبتين 120 الليبوبروتين وليباز 150والبيروكسيسوم عند 130. رابعا: التقييم الكمى الجينى لالأديبوسيت-الأديبونيكتين-الليبتين- البيروكسيسوم المتمايز والمنشط للمستقبل جاما والليبوبروتين ليباز : تم التقدير الكمى للجينات السابق ذكرها فى الزراعات الخلوية للخلايا الجزعية المشتقة من الدهون أو خلايا السائل الأمنيونى وكان التعبير الجينى بدرجة كبيرة فى الخلايا المشتقة من السائل الأمنيونى وبدرجة تعبير ملحوظة. خامسا: الخصائص البيوكيميائية للخلايا الجذعية الدهنية المشتقة من الدهون أو السائل الأمنيونى : لتأكيد تمايز الخلايا الجذعية أظهرت الدراسة التعبير البيوكيميائى لكل من انزيم الداى هيدروجيناز جليسرول ثلاثى الفوسفات – وانزيم الليبوبروتين ليباز والمميز لخصائص تلك الخلايا. سادسا: تمايز الخلايا الجذعية العظمية والغضروفية: اظهرت الدراسات تمايز الخلايا الجزعية المشتقة من الدهون أو السائل الأمنيونى الى خلايا عظمية ذات دلالة فى الاصطباغ للكالسيوم باستخدام صبغ اليزارين أو الفون كوسا . ولقد تمايزت الخلايا الى الشكل المغزلى بعد أربعة ايام من الزرع وتكوين عقيدات ذات تكوين مميز من الكالسيوم الذى ازداد كثافة وتمايز لتكوين رقائق عظمية أولية بعد واحد وعشرون يوما بدرجة أكبر فى المشتقة من خلايا السائل الأمنيونى. ولقد اظهر ذلك بوضوع فى الطلائع البرعمية للخلايا العظمية تحت المجهر الالكترونى النافذ والمحتوى سيتوبلازم خلاياها على السبحيات والشبكة الاندوبلازمية والليسوسومات ولييفات الكولاجين الأكثر وضوحا وتميزا فى الخلايا الجذعية المشتقة من السائل الأمنيونى. ولقد عبر ذلك بوضوح الدلالات البيوكيميائية المميزة للخلاي العظمية وهى انزيم الفوسفاتيز القلوى والبيتا جالاكتوسيداز. ولقد أوضح بوضوح التعبير الجينى للأوستيو كالسين. أما الخلايا الغضروفية ظهرت بوضوح باللون الأحمر وذلك لوجود البروتيوجلايكان عندما صبغت بصبغة Saffranin O وكذلك اتضح وجود الألياف الكولاجينية فى حالة الفحص بالميكروسكوب الالكترونى . لذلك فان هذه الدراسة تهدف الى استخلاص خلايا دهنية وعظمية وغضرفية ومعرفة خصائصها المختلفة لاستخدامها فى علاج الكثير من الأمراض المستعصية مثل مرض السكر والتهاب المفاصل والشلل الرعاش.