الفهرس 
ReviewOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 32 |  |  |
| | | from | 32 | | |
Abstract
يعتبر مرض الحمى القلاعية من أهم الأمراض المعدية بل شديدة العدوى التى تصنف فيرولوجيا تحت اسم عائلة البيكورنا فيروس, وهو مرض يصيب الحيوانات مشقوقة الظفر المستأنسة والبرية.
في هذه التجربة نقوم بدراسة تأثير عدة عوامل: مثل إختلاف الاعمار , نوع الحيوان ،مكان أخذ العينات ونوع اللقاح المستخدم على كفاءة لقاح الحمى القلاعية المثبط لحماية الحيوانات ضد مرض الحمى القلاعية في مصر . وذلك من خلال أخذ عينات مصل الدم من الحيوانات قبل التحصين وبعد التحصين بواحد و عشرين يوم وأيضا بعد أربعين يوم , وقد تم فحص هذه العينات بإختباري إنزيم فحص مرتبط المناعة (ELISA) و إختبار تحديد المصل المتعادل (SNT) .
أولا: التجربة الأولى:-
وقد أوضحت النتائج أن معدل الأجسام المناعية ضد المرض يزيد بشكل ملحوظ مع التقدم في السن كما تعزى هذة النتائج الى أن الأعمار الكبيرة لديها جهاز مناعى ناضج وكامل ، أو من الممكن أن تكون هذة الحيوانات قد تعرضت للإصابة بمرض الحمى القلاعية أو التحصين من قبل.
أما بالنسبة لتأثير عامل المحافظة المأخوذ منها العينات فظهر على النحو التالى : حيث تم تجميع عدد 364 عينة مصل الدم من أربع محافظات مختلفة , من بينهم 109 عينة من محافظة القليوبية , عدد 90 عينة من محافظة الشرقية , عدد 100 عينة من محافظة الأسكندرية وعدد 65 عينة من محافظة المنوفية , وقد أشارت النتائج الى أن أعلى مستوى للأجسام المناعية كانت فى محافظة الأسكندرية وذلك يرجع الى أن تلك المزرعة من مزارع الجيش المغلقة وأيضا المزرعة بالكامل قائمة على تربية الجاموس فقط والتى تعتبر من أكثر المجترات مقاومة للمرض وأقل عرضة للإصابة من الأبقار. أما بالنسبة للأغنام والمجترات الصغيرة عموما لا يوجد نظام معين للتحصين إلا على حدود البلاد وتحصن أيضا ضد العترة الفيروسية (O) فقط كما أنها قد تكون حاملة للمرض ولكن لا يظهر عليها أعراض لذلك تعتبر بمثابة مصدر جيد لإنتقال المرض .
أما بالنسبة لتأثير نوع اللقاح المستخدم للتحصين يعتبر أفضل نوع لقاح , هو الذي يعطي أعلى معدل للأجسام المناعية, يعتبر لقاح أفتوفاكسبور Aftovaxpur ( الخماسي و السداسي ) التابع لشركة ميريال MERIAL هو الذى حقق أعلى معدل للأجسام المناعية , ويأتى فى المرتبة التالية لقاح العباسية الثلاثى العترة ، وأخيرا أدنى عيار للأجسام المناعية هو لقاح Triaphthovac ثلاثى العترة التابع لشركة MEVAC و هذة النتائج قد تأكدت من خلال حدوث الإصابة للحيوانات بعد التحصين, حيث وصلت نسبة الإصابة بعد استخدام لقاح Aftovaxpur السداسي MERIAL الى) 3.17٪ (، أما بالنسبة للقاح المثبط ثلاثى العترة ” العباسية ” نسبة الإصابة وصلت (15.57 ٪) أما اللقاح aphthovac MEVac Tri- تسبب فى نسبة اصابة (46.67٪) , ولم تسجل أى نسبه إصابه عند إستخدام اللقاح الخماسي التابع لشركه ميريال Aftovaxpur MERIAL.
ثانيا:التجربة الثانية:-
في هذه التجربة ندرس تأثير تغيير الفاصل الزمني لتحصين الحمى القلاعية من كل أربعة أشهر الى ستة أشهر على درجة الصد المناعى لدى حيوانات المزرعة . من خلال أخذ عينات مصل الدم من حيوانات المزرعة بعد أربعة أشهر وبعد أربعة أشهر ونصف من التحصين وفحصها بطريقتى انزيم فحص مرتبط المناعة (ELISA) و إختبار تحديد المصل المتعادل (SNT).
وقد أوضحت النتائج أن معدل الأجسام المناعية بعد أربعة أشهر ونصف من التحصين أقل من مثيلتها بعد أربعة أشهر من التحصين كما أكدت هذه النتائج أن الفاصل الزمني بين التحصين كل أربعة أشهر أفضل من كل ستة أشهر حيث يبدأ معدل المستوى المناعى في الإنخفاض بعد أربعة أشهر حتى تختفي تماما بعد ستة أشهر من التحصين مما يعرض الحيوانات الى زيادة معدل الإصابة وخاصة فى الدول المستوطن فيها المرض مثل جمهورية مصر العربية .
ثالثا:التجربة الثالثة:-
فى هذة التجربة تم استخدام الأجسام المناعية ضد البروتين الغير تركيبى للفيروسABC3 في التفريق بين الحيوانات المحصنة و المصابة عن طريق أخذ (30) عينة مصل الدم من الحيوانات في محافظة القليوبية والمحصنة باللقاح الثلاثى ( العباسية ) ، 15 عينة منهم كانت لحيوانات مصابة وظاهر عليها أعراض ، وباقي 15 عينة من الحيوانات الحاملة للمرض علما بأن هذه الحيوانات لم تظهر عليها أي أعراض ، وقد تم استخدام ABC FMDV ’CHECK test 3 للتمييز بين الحيوانات المصابة والمحصنة و تقسيم الحيوانات إلى إيجابية وسلبية لذلك البروتين، يجب أن تكون الحيوانات المحصنة سلبية لهذا البروتين ، لأنه موجود فقط في الحيوانات المصابة كما أوضحت النتائج أن من إجمالى الحيوانات (56.67 ٪) منهم إيجابية مصابة و (43.33 ٪) كانت سلبية محصنة.
رابعا :التجربة الرابعة:-
بعرض النتائج لمتوسط الأجسام المناعيه لكل من الأمهات وولداتهم قبل التحصين بلقاح ثلاثى العترة ( العباسية ) وبعد واحد وعشرين يوم وأربعين يوم من التحصين فى محافظة القليوبية و المنوفية بإختبارى SNT& ELISA . وقد أوضحت النتائج أن معدل الأجسام المناعيه فى المزرعة التى جمعت منها العينات فى محافظة القليوبية أعلى من المستوى المناعى لقرينتها من محافظة المنوفية . وأوضحت النتائج أن المستوى المناعى الوقائى يبدأ فى الأسبوع الثالث وتصل الى أعلى معدل لها بعد أربعين يوم من التحصين.
خامسا:التجربة الخامسة:-
فى هذة التجربة تم التعرف والتصنيف للمعزولات الفيروسية من أنسجة العينات المصابة بفيروس الحمى القلاعية باستخدام FMDV antigen detection ”IZSLER ELISA kits .
وقد أجرى إختبار تفاعل البلمرة المتسلسل (RT-PCR) كإختبار تأكيدى لبعض العينات. وأظهرت النتائج أن الأبقار المصابة في محافظة الغربية مصابه بالعترة الفيروسية (O) لمرض الحمى القلاعية .وكذا خضعت أربع عينات جمعت من الأبقار والجاموس المصابين في محافظة القليوبية للتجربه و أوضحت النتائج أن العترة المعزوله كانت (O) بكل من إختبارى FMD antigen detection & RT-PCR وقد تم تصنيف العترة المعزوله والتى أوضحت أنها تتماثل فى تسلسل النيوكليوتيدات لفيروس المرض بنسبة (98 ٪) Foot-and-mouth disease virus O isolate 05 india iso34, complete genome.
وبتجميع وفحص تسع عينات من الأبقار والجاموس المصابين في محافظة المنوفية: أثبتت النتائج أن سبعة عينات منهم كانت إيجابية للإصابة بفيروس الحمى القلاعية، خمسة منهم كانوا مصابين بالعترة الفيروسية (O)وعينتين تم تصنيفهم (SAT-2) ، وتم تأكيد النتائج بواسطة RT-PCR وبعد ذلك تم التصنيف الذي كشف أن هذه المعزولة تشابة بنسبة (99٪) في تسلسل النيوكليوتيدات لفيروس المرض مع SAT 2 isolate Egy-Kal-18-2014 VP1 gene, partial cds.
بتجميع ثلاث وعشرون عينة من حيوانات مصابة من الأبقار والجاموس في محافظة الجيزة,ستة عشر عينات كانت إيجابية للإصابة بالمرض، ثمانى عينات منهم تم تصنيفهم للعترة الفيروسية (SAT-2) , وسبعة منهم تم تصنيفهم للعترة الفيروسية (O) وعينة واحدة منهم تم تصنيفها للعترة الفيروسية (A)، وتم تأكيد النتائج باستخدام RT-PCR و التى برهنت أن المعزولة (SAT-2) تشابة بنسبة (94٪) في تسلسل النيوكليوتيدات لفيروس مرض الحمى القلاعية مع SAT 2 isolate EGY/7/2012 capsid protein gene, partial cds , أما المعزولة (O) تشبه في تسلسل النيوكليوتيدات بنسبة (95٪) مع فيروس مرض الحمى القلاعية :type O isolate O/3/Giza/EGY/2014 structural protein VP1 gene ,والمعزولة (A) تشبه في تسلسل النيوكليوتيدات بنسبة 99)٪( لفيروس الحمى القلاعية :
Strain A /Cairo /EGY / 2013 structural protein VP1 gene, partial cds.
من إجمالى أربعة عينات تم جمعها من الأبقار المصابة من محافظة الشرقية , ثلاث عينات منها كانت إيجابية للإصابة بفيروس الحمى القلاعية ، أكدت النتائج بواسطة RT-PCRأن هذة المعزوله تم تصنيفها انها( (Aوالتى تشبة العترة الفيروسية فى التسلسل النيوكليوتيدى بنسبة (97%) مع
Foot-and-mouth disease virus - type A isolate 4234 polyprotein gene, partial cds.والمعزولة الثانية تم تصنيفها أنها(O) والتى تشبة العترة الفيروسية فى التسلسل بنسبة (96%) Foot-and-mouth disease virus - type O isolate O /Sharquia /EGY /2014 structural protein VP1 gene.أما المعزولة الثالثة تم تصنيفها انها(O) والتى تشبة العترة الفيروسية فى التسلسل النيوكليوتيدى بنسبة (97%) Foot-and-mouth disease virus - type O isolate O/Sharquia/EGY/2014 structural protein VP1 gene.