الفهرس 
ReviewOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 32 |  |  |
| | | from | 32 | | |
Abstract
لا تزال الكوكسيديا خاصة الكبدية (الناتجة عن الاصابة بطفيل من جنس ايميريا ستيدى Eimeria stiedae) أحد الأسباب المعدية التي تؤدي الى اضطرابات الجهاز الهضمي وتؤثر على تسمين الارنب مما يتسبب في خسائر اقتصادية عند تربية الأرانب.الهدف من الرسالة:استهدفت الدراسة الحالية:-أولا - تشخيص الكوكسيديا الكبدية باستخدام البيولوجيا الجزيئية عن طريق استخدام تقنية تفاعل إنزيم البلمرة التسلسليPolymerase Chain Reaction للكشف عن الطفيل المسبب للكوكسيديا الكبدية ايميريا ستيدى Eimeria stiedae .ثانيا – دراسة التأثير البيوكيميائي والمناعي1-لمسحوق الثوم الجاف و زيت حبة البركة على الارانب المصابة تجريبيا بالايميريا ستيدى.2-لمضاد الكوكسيديا تولترازوریل 2.5 % على الارانب المصابة تجريبيا بالايميريا ستيدى.تم اجراء هذه الدراسة علي 28 ارنب خالي من الكوكسيديا (وضعت كل مجموعة في قفص حديدي خاص بها وتعايشت في نفس الظروف البيئية والتغذية حيث تم تغذيتها على نفس نوع العليقة دوت تميز. كما تم فحص البراز يوميا لمدة 10 أيام قبل بدء التجربة للتأكد من خلوها من الكوكسيديا) وتم تقسيم الأرانب الى أربع مجموعات تتكون كل مجموعة من عدد سبع أرانب :مادة البحث: مجموعة (1) ضابطة غير مصابة بالطفيل وغير معالجة.مجموعة (2) مصابة وغیر معالجة) أصيبت بتغذیتها تجریبیاً ب 40000 حويصلة ناضجة من ایمیریا ستیدى).مجموعة (3) مصابة) أصيبت بتغذیتها تجریبیاً ب 40000 حويصلة ناضجة من ایمیریا ستیدى) و معالجة مسحوق الثوم مع زيت حبة البركة (الثوم جرعة يومية من 0.5 جم / كجم من وزن الجسم مسحوق الثوم + 400 ملغم / كغم من وزن الجسم زيت حبة البركة) لمدة 5 أيام بعد 16 يوم من العدوى. مجموعة (4) مصابة) أصيبت بتغذیتها تجریبیاً ب 40000 حويصلة ناضجة من ایمیریا ستیدى) و معالجة تولترازوریل 2.5 % : (جرعة يومية من 1 مل / لتر ماء الشرب) لمدة 2 يوم بعد 16 يوم من العدوى. طرق البحث: ** العينـــــــــات: تم تجميع عينات الدم و الأنسجة (الكبد) من كل المجموعات بعد 21 يوم من حقن الأرانب بجرعة 40000 حويصلة ناضجة من ایمیریا ستیدى.* أولاٌ: عينـــات الــدم:تم تجميع عينات الدم (من وريد Marginal بالأذن) من كل مجموعة وتقسيمها الى جزئين: الجزء الأول تم وضعه فى أنابيب اختبار جافة، نظيفة، معقمة ومحكمة الإغلاق وتم ترك العينة لمدة 30 دقيقة فى درجة حرارة الغرفة حتى يتجلط الدم، وتم فصل مصل الدم تماماً بواسطة جهاز الطرد المركزي تم تجميع المصل في أنابيب إبندورف جافة ومعقمة. استخدم جزء من هذا مصل الدم مباشرة لقياس نشاط وظائف الكبد (ASTأسبرتات أمينوترانسفيريز, ALT ألانين أمينوترانسفيريز, GGT جاما حلوتاميل ترانسفيريز ,الكالين الفوسفاتيز ALP , مستوى الصفراء الكلية في الدم , البروتين الكلي Total Protein و الألبومين (Albumin. الجزء الثاني تم وضعه فى أنابيب تحتوى على مادة الاديتا ETDA ايثلين داي أمين تترااسيديك اسيد (كمانع للتحلط) للحصول على بلازما، وتم فصل البلازما بواسطة جهاز الطرد المركزي ثم تجميع البلازما في أنابيب إبندورف جافة ومعقمة. استخدمت هذه البلازما مباشرة لقياس نشاط مستوي دلائل الشوارد الحرة من خلال قياس مستوى إل- مالون داى ألدهيد MDA و أنزيمات مضادات الأكسدة جلوتاثايون بيروكسيديز GPx , الكاتاليز CAT و سوبر أكسيد دِسميوتيز SOD *ثانيا: عينات الأنسجة (الكبد):بعد الحصول على الكميات الكافية من الدم، تم ذبح الأرانب حتى يتم أخذ نسيج الكبد ثم غسله جيداً بمحلول ملح فسيولوجي (0.9%) ثم وضعهم منفصلين فى ورق فويل وتم الاحتفاظ بهم فى المجمد عند درجة حرارة 80˚ تحت الصفر لحين تجهيزه و استخدامه في قياس سيتوكينات المناعة انترلوكين1بيتا IL-1ß , انترلوكين2 IL-2 وانترلوكين6 IL-6 *أما عينات الحويصلات الناضجة من ايميريا ستيدي:تم أخذ عينات الحويصلات من ايميريا ستيدي من الحويصلة المرارية بعد غسلها جيداً بمحلول ملح فسيولوجي (0.9%) وتجميع العصارة الصفراوية منها وفصل وتجهيز حويصلات الايميريا ستيدي (توضع العصارة الصفراوية بها حويصلات الايميريا ستيدى غير جرثومية في اطباق معقمة بها محلول البوتاسيوم داي كرومات 2.5% في درجة حرارة الغرفة ويتم فحص الحويصلات يوميا تحت الميكروسكوب حتى تتحول الى جرثومية) لاستخدام تقنية تفاعل إنزيم البلمرة التسلسليPolymerase Chain Reaction للكشف عن الطفيل المسبب للكوكسيديا الكبدية ايميريا ستيدى Eimeria stiedae.نتائج البحث:اظهرت الدراسة الكشف عن الطفيل المسبب للكوكسيديا الكبدية ايميريا ستيديا Eimeria stiedae باستخدام تقنية تفاعل إنزيم البلمرة التسلسلي Polymerase Chain Reactionللمجموعات (مجموعة مصابة وغير معالجة, مجموعة مصابة و معالجة بمسحوق الثوم مع زيت حبة البركة و مجموعة مصابة و معالجة بمادة تولترازوريل 2.5 %) عند نطاق محدد 970 bp.كما أظهرت الدراسة ارتفاع كبير في انزيمات الكبد ASTأسبرتات أمينوترانسفيريز, ALT ألانين أمينوترانسفيريز, GGT جاما حلوتاميل ترانسفيريز, الكالين الفوسفاتيز ALP و مستوى الصفراء الكلية في الدم نتيجة الاصابة بطفيل الايميريا استيديا في مجموعة مصابة وغير معالجة وانخفضت الانزيمات و الصفراء في كلا المجموعتين مجموعة مصابة و معالجة بمسحوق الثوم مع زيت حبة البركة و مجموعة مصابة و معالجة تولترازوریل 2.5 % مع الملاحظة ان التحسن الأكبر في المجموعة المصابة و المعالجة بمادة تولترازوریل 2.5 %. و لكن مستوى كلا من البروتين الكلي Total Protein و الألبومين Albumin لم تتغير وظلت ثابتة تقريبا. كما أثبتت الدراسة أن الأرانب المصابة تعاني من اجهاد تأكسدي وقد وضح ذلك من خلال وجود زيادة معنوية في مستوي الشوارد الحرة إل- مالون داى ألدهيد MDA و وجود نقص معنوي في مستوى جلوتاثايون بيروكسيديز GSH الكاتاليز CAT و سوبر أكسيد دِسميوتيز SOD في المجموعة المصابة وغیر المعالجة وتحسن ذلك الاجهاد في كلا المجموعتين مجموعة مصابة و معالجة بمسحوق الثوم مع زيت حبة البركة و مجموعة مصابة و معالجة تولترازوريل 2.5 %. كما اوضحت الدراسة ان الاصابة بطفيل الايميريا ستيدي للأرانب يؤدي الى نقص معنوي في التعبير الجيني الخاص بسيتوكيننات المناعة انترلوكين 1بيتا IL-1ß و زيادة في التعبير الجيني لسيتوكينات انترلوكين2و6 IL-2 و IL-6 . وضح تاثير المجموعة المصابة و المعالجة بمسحوق الثوم مع زيت حبة البركة بشكل ملحوظ في زيادة التعبير الجيني لسيتوكين انترلوكين6 IL-6 عن المجموعة المصابة و المعالجة بمادة تولترازوریل 2.5 %. بينما كان التأثير غير فعال في باقي السيتوكينات انترلوكين 1بيتا IL-1 ß و انترلوكين2 IL-2 في كلا المجموعتين مجموعة مصابة و معالجة بمسحوق الثوم مع زيت حبة البركة و مجموعة مصابة و معالجة بمادة تولترازوريل 2.5 %.خلاصة البحث:قد توصلت الدراسة الى ان المعالجة باستخدام مضاد الكوكسيديا تولترازوريل 2.5 % اكثر فعالية في تحسين وظائف الكبد (تقارب القياسات البيوكيميائية من هذه المجموعة إلى تلك المجموعة الضابطة غير مصابة وغير معالجة) من المعالجة باستخدام خليط مسحوق الثوم وزيت حبة البركة بينما اظهرت المعاجة في المجموعتين مجموعة مصابة و معالجة بمسحوق الثوم مع زيت حبة البركة و مجموعة مصابة و معالجة تولترازوريل 2.5 % نفس النتائج كعلاج مضاد للتأكسدز. في حين اثبت العلاج بهذا الخليط النباتي تأثيره الفعال كمقوي للمناعة عن العلاج باستخدام مضاد الكوكسيديا تولترازوريل 2.5%.توصيات البحث:كما توصي الدراسة بزيادة الدراسات على طفيل ايميريا ستيدي Eimeria stiedae : 1-استخدام خليط من مسحوق الثوم و زيت حبة البركة في الوقاية من الإصابة دراسة جرعات مختلفة من خليط مسحوق الثوم و زيت حبة البركة في علاج الكوكسيديا الكبدية.