الفهرس 
IntroductionOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 32 |  |  |
| | | from | 32 | | |
Abstract
تعد العدوى بديدان الهيمونكس كونتورتس من الأمراض الطفيلية الأكثر تدميرا وإنتشارا بين القطعان والتي تؤثر على إنتاجية الأغنام و تسبب معدلات مرتفعة للاصابة والوفيات في مزارع الأغنام فى مصر. تعتمد الطرق التقليدية للتشخيص على فحص عينات براز الحيوان للتعرف على نوع البويضات واستكمالها بمزرعة اليرقات. ويعيب هذه الطريقة أنها لاتعطى تشخيص دقيق للإصابة بالطفيل وخصوصا فى حالات الإصابة فى مراحلها الأولى وكذلك المزمنة وقلة عدد البويضات فى البراز. ولذلك هدفت هذه الدراسة إلى تشخيص الإصابة بهذا الطفيل عن طريق التشخيص المناعى بإختبار الإدمصاص المناعى الإنزيمى (الإليزا) كطريقة دقيقة ومساعدة فى التشخيص بإستخدام مولدات ضد مختلفة تم تحضيرها من الديدان البالغة، اليرقات و المنتجات المخرجة والمفرزة، بالإضافة إلى أن هذه الدراسة ألقت الضوء على الجوانب الأساسية لعلم الجينوم للديدان موضع الدراسة عن طريق استخلاص وتضخيم ومعرفة تتابع القواعد الوراثية لكل من انترنال ترانسكربد سباسر 2 ITS-2)) النووى وسيتوكروم أوكسيديز وان جين (COI gene) فى الميتوكوندريا لدراسة الوراثة العشائرية الخاصة بأنواع الهيمونكس مما يؤدي إلى معرفة واسعة بتوزيع وإنتشار هذه الطفيليات .
واشتملت الدراسة على ثلاث مراحل هى:
المرحلة التحضيرية وفيها يتم تجميع العينات ، تحضير مولدات الضد (الانتيجينات)، إنتاج الأجسام المضادة فى الأرانب، والتحليل البروتينى بتقنية الفصل الكهربائى بإستخدام البولى اكريلاميد جيل.
المرحلة التشخيصية من خلال إختبار الإدمصاص المناعى الإنزيمى و التي تمكن من تقييم حساسية ودقة مولدات الضد المختلفة المحضرة للكشف على الأجسام المضادة الخاصة بالحيوانات المصابة بالديدان تجريبيا واستخدام مولد الضد الأكثر حساسية للكشف على الأجسام المضادة الخاصة بالحيوانات المصابة بالديدان حقليا بالإضافة إلى تحديد المكونات المناعيةبه باستخدام تقنية الطبع المناعى.
مرحلة التوصيف الجينى لتقييم الإنسياب الجينى واحتمالية الطفرات اعتمادا على دراسة التتابع النيوكليتدى لجين سيتوكروم أوكسديزوان فى الميتوكوندريا وجين انترنال ترانسكربد سباسر2 النووى.
تم تحضير مولدات الضد المختلفة فى صورتها الخام كمستخلص الديدان البالغة و مستخلص الطور اليرقى الثالث و مستخلص المنتجات المخرجة والمفرزة أو فى صورها المنقاة جزيئيا أو كليا كالبروتين المحور وراثيا 26/23 وتقيمها باستخدام تقنية الفصل الكهربى فى البولى أكريلاميد جل. وقد نتج عن التنقية الجزئية لمولدات الضد المختلفة المحضرة من ديدان الهيمونكس كونتورتس عند فصلها باستخدام مادة السفاديكس درجة 100 فى أعمدة الفصل الكروماتوجرافية ثلاث وحدات كروماتوجرافية من مستخلص الديدان البالغة و مستخلص الطور اليرقى الثالث ووحدتين فقط من مستخلص المنتجات المخرجة والمفرزة. وأظهرت نتائج الفصل الكهربى أن هناك إختلافات ملحوظة بين الحزم البروتينية لمولدات الضد المختلفة المحضرة من الهيمونكس كونتورتس. وبتحليل هذه النتائج ثبت أن هناك أربع حزم بروتينية مشتركة وزنها الجزيئى 43، 60 كيلو دالتون بالنسبة لمولدات الضد المحضرة من الديدان البالغة، بينما حزمة بروتينية وزنها الجزيئى 66 كيلو دالتون بالنسبة لمولدات الضد المحضرة من الطور اليرقى الثالث، وأيضا حزمتين مشتركتين فقط عند 15، 24 كيلو دالتون من مولدات الضد المحضرة من المنتجات المخرجة والمفرزة.وأوضحت الدراسة حزمة بروتينية واضحة وزنها الجزيئى 26 بالنسبة لمولد الضد المحور وراثيا 26/23.