الفهرس 
IntroductionOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 365 |  |  |
| | | from | 365 | | |
Abstract
منذ بدايات التسعينات ، تم اقتراح أدوار غير كالسيومية لفيتامين د3 في ضوء أكتشاف أن مستقبلات الهرمون متواجدة على نطاق واسع شاملة أنسجة غير مشاركة في توازن الكالسيوم أو الفوسفات. وشملت هذه الادوار تنظيم أنقسام الخلايا ، والتمايز ، و / أو موت الخلايا المبرمج. وقد ألهمت هذه الادوار العديد من العلماء لاحتمالية أستخدام الكالسيتريول أو مشابهاته كطريقة علاجية في ظروف تكاثر الخلايا ، أوخلل في التمايز أو أضطراب في الموت المبرمج للخلايا. وحيث أن معظم أدوار فيتامين دي 3 غير الكالسيومية تتم توسطها من خلال تأثيراتها المباشرة أو غير المباشرة على البيئة الدقيقة المحيطة للخلايا المستهدفة ، فان ذلك بستدعي أن يتجاوز التركيز العلاجي للهرمون مستويي تواجده في البلازما.أجريت الدراسة الحالية للتحقيق في الآثار المحتملة للجرعات الفوق فسيولوجية لثلاثة أشكال مختلفة من فيتامين د3 بما في ذلك الكوليكلسيفرول و1و25 داى هيدروكسى فيتامين د3 و1- ألفا هيدروكسي فيتامين د3 على أعضاء التمثيل الغذائي لفيتامين د3. وشملت هذه الأعضاء الكبد والكلى والجهاز المناعي. أجريت الدراسة أيضا للتحقيق في التوازن المعدني في الفئران الحوامل البالب سى ونسلها. كذلك تم فحص نموذج كتكوت تم فيه فحص التعرض لفترة ما حول الفقس لمركبات فيتامين د 3 عبر الأنسجة غير المشيمية ، أي الغشاء المشيمي .1-في الدراسة الحالية ، استخدمت أربع مجموعات كل مجموعة مكونة من 10 فئران من فصيله البالب سي في اليوم الرابع عشر من الحمل التي تم تقسيمها على النحو التالي: - مجموعة أولى تم حقنها داخل الغشاء البريتونى باستخدام 100 ميكروليترمن البروبيلين جليكول (المجموعة الضابطة) ، والمجموعة الثانيه تم حقنها ب 20 نانوجرام كوليكلسيفرول ، كذلك تم حقن المجموعة الثالثة ب20 نانوجرام من 1و25 داى هيدروكسى فيتامين د3. في حين تم حقن المجموعة الرابعة ب50 نانوجرام 1 ألفا هيدروكسي فيتامين د3 /100 ميكروليتر من البروبيلين جليكول لأربع مرات منفصلة كل ثاني يوم على التوالي. تم جمع عينات الدم من الأمهات الحوامل في اليوم (صفر) أي (يوم الحقن اليوم 14 من الحمل) العينة الثانية في يوم الولادة (في اليوم 21) ، والعينة الثالثة بعد 2 أسابيع من الولادة والعينة الرابعة بعد 3 أسابيع من الولادة. تم استخدام دم من العينات الأولى والثانية والثالثة لتحديد مستوي الكالسيوم والفوسفور في الدم. تم تقسيم عينات الدم فى السحبة الاخيرة إلى قسمين. القسم الاول تم تجميعه على أديتا لقياس صورة الدم والقسم الثانى لفصل المصل واجراء التحاليل البيوكيميائية للقياسات الاتية: الكالسيوم والفسفور والكرياتينين واليوريا والألبومين وتركيزات الفوسفاتيز القاعدى وأسيد فوسفاتيز ، أنزيم اﻷﻷنين ترانس امينيز ، أنزيم أسبارتيت ترانس امينيز ، وأنزيم الجلوتاثيون عالى اﻷكسدة . كما تم رصد نشاط الغدة الدرقية عن طريق تحديد مستوى ثلاثي ايودوثيرونين الحر والثيروكسين الحر بالمصل ايضا. كما تم عمل الفحص النسيجي للغدة الثيموسية. تم جمع الدم من بعض الفئران حديثي الولادة في يوم الولادة ، عن طريق ثقب في القلب تحت تاثير الداى ايثيل ايثير كمخدر عام. تم جمع عينات على اديتا لتحديد صورة الدم وايضا تم تجميع عينات لتقدير القياسات الاتية: الكالسيوم ، الفوسفور ، الألبومين ، اليوريا ، الكرياتينين ، أنزيم اﻷﻷنين ترانس امينيز و أنزيم أسبارتيت ترانس امينيز على التوالي في المصل ايضا ، تم حصاد غدة الثيمس و عمل الفحص النسيجي لها وتم قياس نسبة الكالسيوم والفوسفور فى رماد المواليد. أجريت دراسة مناعية على المواليد الذين يبلغون من العمر ستة أسابيع لتقييم أثر التعرض للولادة لأشكال مختلفة من فيتامين د3 على سلامة أداء الخلية التائية 1و الخلية التائية 2. تم تقييم استجابة الخلية التائية 1 عن طريق قياس رد فعل الحساسية التلامسية للأوكزاولون مستخدمًا اختبار تورم أذن الفأر. كما تم حقن الفئران 200 ميكرولتر من 2.5 كرات الدم الحمراء الخاصة بالغنم ، تم التعبير عن تفاعل الخلية التائية 2 كدالة لاستجابة الاجسام المضادة من النوعيه (M) تم قياس وزن الجسم الكلي للحيوانات وتم قياس مستويات الكالسيوم والفوسفور في الدم كل أسبوعين. تمت التضحية بالمواليد بعد 6 أسابيع من الولادة وتم جمع عينات الدم لقياس صورة الدم والتحاليل البيوكيميائية. تم تقدير القياسات الاتية: الكالسيوم ، الفوسفور ، الكرياتينين ، اليوريا والألبومين ، ثلاثي ايودوثيرونين الحر والثيروكسين الحر. بالإضافة إلى الفوسفاتيز القاعدى ، اسيد فوسفاتيز ، أنزيم اﻷﻷنين ترانس امينيز ، أنزيم أسبارتيت ترانس امينيز ، وأنزيم الجلوتاثيون عالى اﻷكسدة. تم عمل فحص نسيجي للكبد ,الكلى والغدة الثيموسية. 2-في هذه الدراسة ، تم توزيع مائتي بيضة مخصبة (هاى لاين) على 4 مجموعات من كل 50 بيضة ، المجموعة الأولى التي تم حقنها مع 100 ميكروليتر من البروبيلين جليكول. المجموعة الثانية الكوليكلسيفرول حيث تم حقنها 20 نانو جرام /100 ميكروليتر من البروبيلين جليكول والمجموعة الثالثة التي تم حقنها 20 نانوجرام 1و25داى هيدروكسي فيتامين د3 /100 ميكروليتر من البروبيلين جليكول والمجموعة الرابعة التي تم حقنها 50 نانوجرام 1- ألفا هيدروكسي فيتامين د3 /100 ميكروليتر من البروبيلين جليكول في الغرفة الهوائية في اليوم 12 من الحضانة ، على التوالي. تم جمع الدم من الأوعية الجنينية الزائدة والسائل الامنيونى والالنتويك من فرخ الجنين في 15 و 16 و 17 يوما من الحضانة أي (بعد 3-5 أيام من الحقن). تم جمع عينات الدم في أنابيب معقمة وقسمت إلى قسمين. الاول لفحص المعاملات البيوكيميائية في الدم بما في ذلك: الكالسيوم ، الفوسفور ، الفوسفاتيز القاعدى والاسيد فوسفاتيز ، أنزيم اﻷﻷنين ترانس امينيز ، أنزيم أسبارتيت ترانس امينيز ، الالبيومين ، الكرياتينين ، اليوريا ، القسم التانى أحتوت الأنابيب على اديتا كمضاد للتجلط لتحديد الهيموجلوبين ، والصفائح الدموية ، وعدد خلايا الدم البيضاء ، والخلايا الليمفاوية والنتروفية ، ومحتوى الكالسيوم والفوسفور. أيضا ، تم جمع عينات السائل الامنيونى والالنتويك في أنابيب معقمة لفحص القياسات البيوكيميائية بما في ذلك: أنزيم اﻷﻷنين ترانس امينيز ، و أنزيم أسبارتيت ترانس امينيز ، و الالبيومين ، الكرياتينين ، اليوريا ، الكالسيوم ، الفوسفور، الفوسفاتيز القاعدى والاسيد فوسفاتيز وانزيم الجلوتاثيون عالى اﻷكسدة. لتحديد انزيم الجلوتاثيون عالى اﻷكسدة فى الكبد والمخ ، تمت إزالة أنسجة الكبد والدماغ. وأيضا تم اخذ الثيمس والكبد والكلى والبرسا للدراسات النسيجية.3-في هذه الدراسة ، تم أستخدام مائتي من الكتاكيت عمر يوم . في يوم (5) من التجربة ، تم تقسيم الكتاكيت إلى أربع مجموعات: 50 كتكوت لكل مجموعة وتم التعامل معها على النحو التالي: المجموعة الضابطة ، تم حقن الكتاكيت داخل العضلة باستخدام 100 ميكروليتر بروبيلين جليكول. المجموعة الثانية ، تم حقن الكتاكيت داخل العضلة مع 20 نانوجرام الكوليكلسيفرول / 100 بروبيلين جليكول ، المجموعة الثالثة تم حقن الكتاكيت داخل العضلة 20 نانو جرام 1و25 داى هيدروكسى فيتامين د3/ 100 بروبيلين جليكول . المجموعة الرابعة تم الحقن في العضلة 50 نانوجرام 1- ألفا هيدروكسي فيتامين د3 /100 بروبيلين جليكول. بعد يومين من الحقن بالمعاملات عند عمر 7 ايام تم تحصين الكتاكيت بالنيوكسل وتم جمع الدم في اليوم صفر (قبل الحقن باللقاح) ، وبعد 3 و 7 أيام من التحصين وذلك عن طريق أختبار منع تلاصق الدم لتقدير الأجسام المناعية المنتجة ضد التحصين بفيروس مرض النيوكسل إلى الكتاكيت . تم جمع الدم من الكتاكيت في اليوم صفر (قبل الحقن بالمعاملات) ، بعد أسبوع واحد و أسبوعين من المعاملة ، في هذه العينات الثلاثة ( اليوم صفرو 12 و19) تم تحديد مستوى الكالسيوم والفوسفور. في نهاية التجربة ( فى عمر 20 يوم) ، تم التضحية بالكتاكيت. تم جمع عينات الدم في أنابيب معقمة وقسمت إلى قسمين. الاول لقياس المعاملات البيوكيميائية في تجربة الفئران بما في ذلك: ، أنزيم اﻷﻷنين ترانس امينيز ، أنزيم أسبارتيت ترانس امينيز ، الالبيومبن ، الكرياتينين ، اليوريا ، الفوسفاتيز القاعدى ، الاسيد فوسفاتيز ، ثلاثي ايودوثيرونين الحر وهرمون الثيروكسين الحر. احتوت الأنابيب الأخرى على اديتا كمضاد للتجلط لتحديد الهيموجلوبين والصفائح الدموية وعدد خلايا الدم البيضاء والخلايا الليمفاوية والنتروفية.كشفت النتائج والتحليل الإحصائي ما يلي:.1-أظهرت الفئران الحوامل التي حقنت بالكوليكلسيفرول و1و25 داى هيدروكسي فيتامين د3 و 1- ألفا هيدروكسي فيتامين د3 زيادة كبيرة في مستوى الكالسيوم والفوسفور و الفوسفاتيز القاعدى والاسيد فوسفاتيز مقارنة بالمجموعة الضابطة. كانت ايضا هناك زيادة معنوية في مستوى أنزيم اﻷﻷنين ترانس امينيز ، أنزيم أسبارتيت ترانس امينيز ، الألبومين ،انزيم الجلوتاثيون عالى اﻷكسدة و تدهور بدرجات مختلفة في وظائف الكلى من خلال زيادة مستويات الكرياتينين واليوريا في الدم ، كما أظهرت بيانات صورة الدم من الأمهات المعاملين بفيتامين د3 زيادة معنوية كبيرة في عدد خلايا كرات الدم البيضاء الكلية ، والخلايا الليمفاوية والنتروفية بالمقارنة مع المجموعة الضابطة. من ناحية أخرى ، كان هناك انخفاض ملحوظ في مستوى الهيموجلوبين والصفائح الدموية. أدت المعاملة بالكوليكلسيفرول و1و25 داى هيدروكسي فيتامين د3 و 1- ألفا هيدروكسي فيتامين د3 الى زيادة كبيرة في مستويات ثلاثي ايودوثيرونين الحر و الثيروكسين الحر ثلاثة أسابيع بالمقارنة مع مجموعة الضابطة المقابلة. أظهرت إدارة الفترة المحيطة بالولادة بالكوليكلسيفرول و1و25 داى هيدروكسي فيتامين د3 و 1- ألفا هيدروكسي فيتامين د 3 زيادة كبيرة في مستوى الكالسيوم ، الفوسفور و نسبة الكالسيوم والفسفور الكلي في رماد الفئران حديثي الولادة. لوحظت زيادة معنوية في مستويات أنزيم اﻷﻷنين ترانس امينيز ، أنزيم أسبارتيت ترانس امينيز ، الألبومين والكرياتينين و اليوريا. تمت مواجهة انخفاض كبير في مستوى الهيموجلوبين في الدم والصفائح الدموية في الدم على العكس من ذلك ، فإن تناول مركبات فيتامين د 3 في الفترة المحيطة بالولادة زاد إجمالي عدد خلايا الدم البيضاء والخلايا الليمفاوية والنتروفية. لقد عانى جميع النسل المعالج بالفيتامين د3 من مستويات مرتفعة من الكالسيوم والفوسفور بعد أسبوعين وأربعة وستة أسابيع. المعاملة قبل الولادة ب1و25 داى هيدروكسي فيتامين د3 ادى الى تركيزات الكالسيوم والفوسفور في الدم أعلى من الكوليكلسيفرول و 1- ألفا هيدروكسي فيتامين د3. بذل المعاملة في الفترة المحيطة بالولادة بجميع مركبات فيتامين د3 درجة متفاوتة من الأضرار في الأنسجة الكبدية والكلى التي تم تصويرها من قبل أرتفاع انزيمات الكبد واليوريا والكرياتينين. لوحظ حدوث تلف كلوي كبدي كان أكثر أثرا في نسل الأمهات اللاتي تعرضن للمعاملة ب 1- ألفا هيدروكسي فيتامين د3 عند مقارنتهن بالأمهات اللواتي تعاملن مع الكوليكلسيفرول و1 و25 هيدرووكسي فيتامين د3. كما تم رصد مايعرف بتكوين عوامل الدم الخارج نخاعي داخل انسجة الكبد . وقد عانى جميع الحيوانات المعرضة لفيتامين د3 من زيادة كبيرة في مستوى أنزيم اﻷﻷنين ترانس امينيز ، أنزيم أسبارتيت ترانس امينيز ، الفوسفاتيز القاعدى والاسيد فوسفاتيز والألبومين انزيم الجلوتاثيون عالى اﻷكسدة ، اليوريا ، الكرياتينين ، مستويات ثلاثي ايودوثيرونين الحر و الثيروكسين الحر وعدد خلايا الدم البيضاء ، والخلايا الليمفاوية والنتروفية. كان هناك أيضا انخفاض في تركيزات الهيموجلوبين في الدم وعدد الصفائح الدموية في هذه الحيوانات بالمقارنة مع الفئران المجموعة الضابطة .2-أظهرت أجنة الدجاج المعالجة بالكوليكلسيفرول و1و25 داى هيدروكسي فيتامين د3 و 1- ألفا هيدروكسي فيتامين د3 أنخفاض ملحوظ فى مستوى الهيموجلوبين وعدد الصفائح الدموية في اليوم 15 و 16 و 17 من الحضانة. من ناحية أخرى ، كان هناك زيادة كبيرة في عدد خلايا الدم البيضاء ، والخلايا الليمفاوية والنتروفية في 15 و 16 و 17 يوم من الحضانة وأيضا زيادة ملحوظة في الكالسيوم ، الفسفور ، الكرياتينين ، اليوريا ، أنزيم اﻷﻷنين ترانس امينيز ، أنزيم أسبارتيت ترانس امينيز ، الفوسفاتيز القاعدى ، أسيد فوسفاتيز والألبومين مقارنة بالمجموعة الضابطة فى الدم والسائل الالنتويك والامنيوتيك . وأظهرت النتائج أرتفاع في مستوى أنزيم الجلوتاثيون عالى اﻷكسدة في السائل الأمنيوسي والسائل الالنتويك ، وكذلك زيادة مستويات الجلوتاثيون عالى اﻷكسدة فى الكبد والمخ ونسبة الكالسيوم و الفوسفور الكلى في رماد الجنين و الصفار. أظهرت نتائج هذا البحث أن المعاملة بفيتامين د3 ومشتاقاته يؤثر على سلامة كبد وكلى الجنين وأدائهم بطرق مختلفة. وأيضا كان هناك تأثير على البرسا والثيمس. 3-أدى تأثي الحقن العضلي بالكوليكلسيفرول و 1و25 هيدروكسي فيتامين د3 و 1- ألفا هيدروكسي فيتامين د3 في الكتاكيت عمر 5 ايام إلى زيادة في مستويات في الكرياتينين ، اليوريا ، أنزيم اﻷﻷنين ترانس امينيز ، أنزيم أسبارتيت ترانس امينيز ، الفوسفاتيز القاعدى ، اسيد فوسفاتيز والألبومين. و أيضا ادت المعاملة بالكوليكلسيفرول و1و25 هيدروكسي فيتامين د3 و 1- ألفا هيدروكسي فيتامين د3 الى زيادة معنوية في الجلوتاثيون عالى اﻷكسدة فى الكبد والمخ مقارنة بالمجموعة الضابطة وأيضاً زيادة في عدد خلايا الدم البيضاء ، والخلايا الليمفاوية والنتروفية و مستويات ثلاثي ايودوثيرونين الحر و الثيروكسين الحر ولكن في نفس الوقت ، كان هناك انخفاض كبير في مستوى الهيموجلوبين وعدد الصفائح الدموية. وأظهرت البيانات زيادة كبيرة في الكالسيوم والفوسفور وأيضا الأجسام المضادة. كان الفحص الباثولوجي للبرسا في وقت الصفر (قبل الحقن مع معاملات فيتامين د3) متشابهًا في جميع المجموعات ولكن بعد أسبوعين من العمر أظهرت البرسا بعض التغيرات مقارنةً بالمجموعة الضابطة.الخلاصة نتائج هذه الدراسة تلقي الضوء علي الفارق في أستيعاب النظرة الي فيتامين (د3) كهرمون او كعامل مؤثر في محركات الخلية أو عوامل النمو. ويتحدد هذا الفارق بمحل تأثيره والمستوي المتطلب لاداء وظيفته الفسيولوجية. بمعني اخر فان فيتامين (د3) يمارس دوره في توازن الكالسيوم بالجسم من خلال وجوده في تيار الدم محكوما بالمستويات القياسية الطبيعة لتركيزه في البلازما. ومن الناحية الاخري فأنه من خلال عمله كعامل مؤثر في محركات الخلية أو عوامل النمو فانه يستهدف مجموعة مختارة من الخلايا من خلال تركيزات يتم مضاعفتها في المحيط الدقيق للخلايا بتأثير هرمون الالفا هيدروكسيليز المفرز من خلايا محيطة ومن خلال تأثيره علي 25 هيدروكسي فيتامين (د3) الخارج خلوي فان ذلك يؤدي الي أنتاج كميات كبيرة نسبيا من الكالسيتريول من واقع ضيق مساحة تمركزه ودون التأثير علي مستواه الجسمي العام. ومن هذه الدراسة لايمكن التعويل علي أستخدام كميات كبيرة من فتامين (د3) للحقن العام والمستثير لمستويات عالية من الكالسيوم بالدم لأحداث تأثير معدل لخلل في محركات الخلية أو في عوامل النمو لان ذلك أثبت انه يؤدي الي ضرر في أنسجة الكبد والكلي مصاحب بخلل في وظائفيتيهما في حيوانات البالب سي الحوامل. كما ان نسل حيوانات البالب سي الحوامل يعاني من تضرر نسيجي ووظيفي في الكبد والكلي وحدوث مايعرف التكوين الدموي الخارج نخاعي بالاضافة الي احتمال حدوث خلل في الية كبح الاستجابة المناعية. وأيضا فى نموذج أجنة الدجاج قد ظهر تضرر نسيجي ووظيفي في الكبد والكلي وأيضا أدى الحقن ب 1- الفا هيدروكسى فيتامين د3 الى التأثير الاكثر فى المجموعات من حيث الضرر وموت الأجنة فى البيض .لذلك نوصى بعمل توجيه موضعى لفيتامين د3 وذلك لتفادى الاضرار النانجة عن أستخدامه كعامل مؤثر في محركات الخلية أو عوامل النمو.