الفهرس | Only 14 pages are availabe for public view |
Abstract تهدف الدراسة الحالية إلى دراسة انزيم الهايولورونيداز كأحد عوامل الضراوة في المكورات البكتيرية موجبة الجرام و المسؤول عن انتشار البكتيريا و السموم التابعة لها في النسيج الضام للعائل. علي الأخص بكتيريا المكورات العنقودية الذهبية, البكتيريا السبحية; الاستربتوكوكاس نيومونيا و الاستربتكوكاس بيوجيناس. لتحقيق هذا تم عزل 128 عزلة و تشمل 85 عزلة من المكورات العنقودية الذهبية, 17 عزلة من البكتيريا السبحية الاستربتكوكاس نيومونيا و 26 عزلة من الاستربكوكاس بيوجيناس من مصادر سريرية مختلفة. تم الكشف عن الانتاج المتماثل لبروتين الهايولورونيداز في هذه العزلات باستخدام التجربة المظهرية مقايسة الأطباق plate assay. أظهرت النتائج ان 82.3 % من عزلات المكورات العنقودية الذهبية , 58.8 % من عزلات الاستربتكوكاس نيومونيا و 61.6 % من عزلات الاستربكوكاس بيوجيناس لهم القدرة علي انتاج بروتين الهايولورونيداز. علاوة علي ذلك تم دراسة مدي التعبير عن جين الهايولورونيداز في 24 عزلة من المكورات العنقودية الذهبية بالاضافة الي السلالة المرجعية Newman باستخدام تفاعل البلمرة المتسلسل الكمي qPCR. و تم الربط بين هذه النتائج و نتائج التجربة المظهرية لنفس العزلات حيث وجد ان جين الهايولورونيداز تم التعبير عنه جينيا في 20 عزلة من المكورات العنقودية الذهبية من ضمنهم السلالة المرجعية Newman بينما لم يتم التعبير عنه في الخمس عزلات الباقيين بالرغم من قدرتهم علي انتاج البروتين مظهريا. و قد تم ايضا قياس التعبير المغاير لانزيم الهايولورونيداز التابع لسلالتين من بكتيريا المكورات العنقودية الذهبية (Newman و S10) في بكتيريا عصويات القولون E. coli BL-21. وتم التأكد من وجود البروتين مظهريا بالاضافة الي الترحيل الكهربي SDS-PAGE و Western blot. بالاضافة الي ذلك, تم دراسة بعض العوامل الفزيائية (الأس الهيدروجيني و درجة الحرارة) و الكميائية (الكالسيوم, الماغنيسيوم, المنجنيز, EDTA و اليوريا) علي نشاط بروتين الهايولورونيداز المنتج بواسطة بكتيريا عصويات القولون E. coli BL-21. |