الفهرس 
IntroductionOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 143 |  |  |
| | | from | 143 | | |
Abstract
لقد كان الهدف الأساسي من الدراسة الحالية عزل بكتريا المكورات العنقودية الذهبية بما في ذلك بكتيريا المكورات العنقودية الذهبية المقاومة للمضادات الحيوية واستخدام الفاجات والجسيمات النانوية كبديل في علاج المكورات العنقودية في عدوى الجروح الجلدية.
تم جمع 37 عينة من الصديد في أجزاء مختلفة من أجسام المصابين بجروح جلدية ملتهبة في مستشفى قصر العيني في قسم الجراحة وجراحة التجميل في قسم الطوارئ وقسم جراحة الوجه والفكين ، جامعة القاهرة ، مصر. تم تعليق العينات في محلول ملحي عادي (0.8٪) وتم تخفيفها حتى 10-4 وزرعت على وسط أجار مغذي وحضنت عند 37 درجة مئوية لمدة 18-24 ساعة ، 83 مستعمرة منفردة لهم نفس الطابع المورفولوجي الشبيه لبكتريا المكورات العنقودية ، جميع العينات جمعت وتم فحصها بصبغة جرام ، نتائج صبغ الجرام للعزلات أعطت 22 عزلة موجبة لصبغة جرام و 61 عزلة سالبة لصبغة جرام ، تم زرع العينات الموجبة لصبغة جرام على وسط المنيتول وحضنت عند 37 درجة مئوية لمدة 24 -48 ساعة. بعد زراعة 22 عزلة وجدنا 7 عزلات نمت ولديها القدرة على تخمير المانيتول وتحويل لون الوسائط إلى اللون الأصفر ، العزلات النامية سميت كالأتي (S001 ، S002 ، S003 ، S004 ، S005 و S006 و .(S007
تم تحديد الخصائص المورفولوجية والمزرعية لسبع عزلات بكتيرية ، العزلات البكتيرية السبع كانت صغيرة الحجم ، ذات سطح أملس ، دائري ، محدب الشكل وغيرت لون الوسائط إلى أصفر ، شكل العزلات البكترية تحت المجهر الألكتروني كانت كروية في الشكل في ترتيب يشبه عناقيد العنب.
التوصيف البيوكيميائي مثل اختبار تجلط بلازما الدم للتمييز بين عزلات القادرة على أحداث تجلط البلازما والعزلات الغير قادرة على أحداث تجلط النتائج كانت 4 عزلات قادرة على أحداث تجلط بلازما الدم و3 عزلات أعطت تجلط طفيف ، تم اختبار انزيم الكتاليز وكانت جميع العزلات 7 إيجابية ، كما كان اختبارأنزيم الاكسيديز كانت سلبية لـجميع العزلات ، أما بالنسبة للقدرة على تحلل الدم فجميع العزلات عند زرعها على وسط الدم لها القابلية على تحلل الدم نوع بيتا أي نشاط انحلال دموي كامل
تم اختيار سبعة عشر نوع من المضادات الحيوية المختلفة لإجراء اختبار الحساسية على العزلات الميكروبية وحساب قطر التثبيط للنمو الميكروبي بالمليميتر، أظهرت النتائج أن العزلات الميكروبية لديها قدرة واسعة على مقاومة المضادات الحيوية ، تم تحديد نوع العزلات المييكروبية بواسطة جهاز VITEK 2 ، 4 عزلات تم تحديدها Staphylococcus aureus والتي كانت S001 و S003 و S005 و S006.
تم تحضير جزيء كيتوزان النانوي في كلية الزراعة ، جامعة عين شمس ، القاهرة ، مصر ، بناءً على طريقة التصفية الأيونية ، بينما جزيئات الفضة النانوية تم شرائها من شركة نانو جيت ، القاهرة ، مصر. تم دراسة خصائص الجسيمات النانوية عن طريق المجهر اللألكترون ، كان متوسط الحجم أقل من 40 نانوميتر وشكلهما كروي ، تم أجراء اختبار السمية للجسيمات النانووية على خلايا حية لتحديد السمية، وكان نتائج جسيمات الفضة النانوية سامة بينما جسيمات الكيتوزان النانوية أمنه ، وتم اختبار الجسيمات النانووية كمضاد ميكروبي على عزلات المكورات العنقودية الذهبية كلاهما نتائج جيدة لتثبيط نمو البكتيريا.
تم جمع 30 عينة مختلفة من مياه الصرف الصحي من مناطق مختلفة في بنها ومحافظة القاهرة لعزل العاثيات ، وكشف البكتريوفاجات التي تم إجراؤها باستخدام اختبارspot test القياسي وتقنيات plaque assayعلى التوالي
تم الحصول على فاجات نقية عن طريق التقاطها من الوسط الزرعي الغذائي من طبقة الاجار المزدوج واحتضانها مع بكتريا المكورات العنقودية الذهبية عند 37 درجة مئوية لمدة 18-24 ساعة ثم الطرد المركزي عند 6000 دورة في الدقيقة لمدة 20 دقيقة وتنقيتها بواسطة ترشيحها بمرشح معقم ذات قطر0،45 نانوميتر.
كانت مورفولوجيا الفاجات في شكل بقع واضحة صغيرة جدًا على وسط الاجار المزدوج ، تم فحص الفاجات بواسطة المجهر الألكتروني مصبوغة بـ 2٪ من مادة PTA وأظهرت النتائج أن الفاجات المعزولة تنتمي إلى عائلة Siphoviridae مع قطر رأس 78.44 ± 1 وذيل 215.54 ± 3. ، تم تحديد قدرة العاثيات على اصابة وتحلل انواع أخرى من الميكروبات من خلال فحص الفاجات على السلالات ميكروبية المتبرعة بها وايضا تم أختبارها على عزلات المكورات العنقودية الذهبية المعزولة لهذه الدراسه ,S005, S006 S003, S001, وعزلات أخرى تم التبرع بها مثل , S.aureas, Salmonella spp, E. coli، Pseudomonas spp ، أظهرت البيانات التي تم الحصول عليها أن نشاط عاثية أعطت تحلل جزئي للعزلة S006 ولا لـم تظهر أي تحلل للعزلتين S001 و S003 ، بينما نتائج التحلل على العزلات المتبرع بها ظهر تحلل جزئي على عزلتين من سلالات بكتيرية تابعة للمكورات العنقودية الجلدية ولم يلاحظ أي تحلل على السلالات الأخرى .
تم أختبار الثباتية للفاجات تحت ظروف بيئية مختلفة وقد لوحظ استقرار العاثية تحت درجات حرارة مختلفة ( 4ºم ،20ºم ، 40ºم ،50ºم ، 60ºم 70ºم ودرجة حرارة الغرفة) بشكل منفصل لمدة ساعة واحدة ، أظهرت النتائج أن الفاجات وجدت تكون مقاومة للحرارة وقادرة على البقاء على قيد الحياة في 50 درجة مئوية لمدة ساعة واحدة وأعطت التحلل الجزئي عند 60 درجة مئوية وتم تعطيلها تمامًا عند 70 درجة مئوية.
لوحظ طول العمر الفاجات عن طريق إبقاءها في درجة حرارة الغرفة 25-28 درجة مئوية لمدة 10 أسابيع ، وفحصها كل أسبوع ، النتائج أظهرت أن الفاجات أعطت نفس النشاط لمدة 6 أسابيع وتعطي نشاطًا جزئيًا في الأسبوع 6 و 7 ، نشاط الملتهمة المعزول أصبح ضعيفا في الأسبوع 9 و 10.
تم الحصول على الخليط عن طريق خلط كميات متساوية من 500 ميكرولتر من الفاجات والجسيمات النانوية من أجل 4 تراكيز من 1مجم/ ملي ، 0.5 مجم / ملي ، 0.25 مجم/ ملي و 0.125 مجم/ ملي) ، كانت الدراسة لتحديد نشاط الفاجات المعزولة والجسيمات النانوية معًا كنشاط مضاد للميكروبات ، أظهرت النتائج أن جسيمات الفضة النانوية لها نشاط سام على الفاجات والجسيمات عطلت نشاط الفاجات نفس النتيجة التي لوحظت عند استخدام جسيمات الكيتوزان النانوية أيضا قامت بتثبيط نشاط الفاجات باستثناء تركيز 0.125 الذي أظهر نشاط طفيف للفاجات ، بينما نشاط الجزيئات النانوية لم يتاثر مطلقا بالفاجات ولوحظ تثبيط ميكروبي