الفهرس 
AcknowledgmentsOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 288 |  |  |
| | | from | 288 | | |
Abstract
يعتبر مرض الكبد الدهني اللاكحولي من أكثرالأمراض انتشارا في العالم وهوعبارة عن مجموعة من التغيرات الغير نهائية القابلة للشفاء والتي قد تبدأ بالزيادة في الوزن، ويتبعها خلل في عملية الاحتراق والإيض داخل الجسم . يتميز مرض الكبد الدهني اللاكحولي بتراكم غير طبيعي للدهون الثلاثية ترايسي الجلسرول ( اكثر من 5% من الوزن الكلي) مع تطور في مقاومة الأنسولين والإجهاد التأكسدي و الالتهاب كعوامل ملازمة . ومن ثم الانتقال الي إلتهاب الكبد الدهني غير الكحولي و تليف خلايا الكبد و تشمع الكبد و في النهاية سرطان الخلايا الكبدية.
وجاءت هذه الدراسة لتحديد مدى كفاءة مضادات الأكسدة الطبیعیة مثل (الاسبيرولينا والاوميجا-3 ) التي تعمل كمخفضات للدهون وكمضادات للأكسدة ومضادات إلتهاب في تحسین وعلاج مرض الكبد الدهني اللاكحولي المحدث تجريبيا في الجرذان عن طريق تناول عليقة عالية في الدهون لمدة شهرين.
أظهر العلاج باستخدام الاوميجا-3 القدرة علي الحد من تنخر الكبد في نماذج الجرذان، وأظهر تأثير مضاد للتشحم و تحسين الكبد الدهني في الفئران السمينة، كما ظهرت فوائد صحية للأسبيرولينا كمضاد للأكسدة، ومضاد للألتهابات، وبالتالي مضاد للسرطان، واثار أخري وقائية ضد فرط شحوم الدم، وسوء التغذية، السمنة، والسكري. هذا وقد تم التحقق من التأثير العلاجي لكل من (الاسبيرولينا والاوميجا-3 ) ضد مرض الكبد الدهني اللاكحولي المحدث تجريبيا في الجرذان البيضاء البالغين.
وقد أجريت هذه الدراسة على عدد 35 من ذكور الجرذان البيضاء, و تتراوح أعمارها من ثمانية إلي عشرة أسابيع وأوزانها بين 160- 170 جرام ، تم الحصول عليهم من مركز الحيوانات المختبرية، كلية الطب البيطرى، جامعة بنها. وقد تم وضع هذه الجرذان فى أقفاص معدنية منفصلة بحجرة خاصة لرعاية حيوانات التجارب بقسم الكيمياء الحيوية بالكلية وزودت بالمياه العذبة النقية وأبقيت الجرذان على ظروف بيئية وغذائية ثابتة طوال خمسة عشر يوماً للتأقلم على الظروف المعملية قبل بداية التجربة .
تصميم التجربة البحثية:
تم تقسيم الجرذان عشوائيا إلي خمسة مجموعات متساوية اشتملت كل مجموعة علي عدد 7 جرذان، ووضعت في اقفاص فردية، وتم توزيعها كالأتي:
1) المجموعة الأولي ( المجموعة الضابطة الطبيعية):
اشتملت على 7 جرذان تم تغذيتهم علي العليقة العادية الحافظة فقط و لم تعطى أي أدوية واستخدمت كمجموعة ضابطة للمجموعات الأخرى.
2) المجموعة الثانية (المجموعة المصابة بمرض الكبد الدهني اللاكحولي):
اشتملت على 7 جرذان تمت تغذيتهم علي نظام غذائي عالي في نسبة الدهون لمدة 8 اسابيع لإحداث مرض الكبد الدهني اللاكحولي تجريبيا.
3) المجموعة الثالثة: (المجموعة المصابة بمرض الكبد الدهني اللاكحولي و تتلقي علاج بالاسبيرولينا):
إشتملت على 7 جرذان مصابين بمرض الكبد الدهني اللاكحولي المحدث تجريبيا وقد تم تجريعهم بالاسبيرولينا عن طريق الفم لمدة 8 اسابيع مرة واحدة يوميا صباحا.
4) المجموعة الرابعة: (المجموعة المصابة بمرض الكبد الدهني اللاكحولي تتلقي علاج بالاوميجا-3 ):
إشتملت على 7 جرذان مصابين بمرض الكبد الدهني اللاكحولي المحدث تجريبيا وقد تم تجريعهم بالاوميجا عن طريق الفم لمدة 8 اسابيع مرة واحدة يوميا في الصباح.
5) المجموعة الخامسة:(المجموعة المصابة بمرض الكبد الدهني اللاكحولي وتتلقي علاج الاسبيرولينا مع الاوميجا-3):
إشتملت على 7 جرذان مصابين بمرض الكبد الدهني اللاكحولي المحدث تجريبيا وقد تم اعطائهم االخليط عن طريق الفم لمدة 8 اسابيع مرة واحدة يوميا فى الصباح بجرعة مقدارها 250 مليجرام لكل 1 كيلوجرام من وزن الجرذ لمدة 8 أسابيع.
العينات:
تم تجميع عينات دم عشوائية وعينات من الانسجة (الكبد) من جميع مجاميع الجرذان (الضابطة والمصابة) وتم التجميع بعد ثمانية أسابيع من بداية العلاج بالاسبيرولينا و الاوميجا-3.
• عينات الدم :
تم جمع عينات الدم بعد الصيام طوال فترة الليل من الجيب الوريدي خلف العين في أنابيب نظيفة ، جافة ومعقمة وترك العينة 15 دقيقة حتى تتجلط ثم فصل المصل بواسطة جهاز الطرد المركزي وذلك عند سرعة 3000 لفة في الدقيقة لمدة 15 دقيقة بعدها تم جمع السيرم في أنابيب جافة ومعقمة بواسطة ماصة اتوماتيكية وتم حفظ السيرم في المجمد عند درجة 20˚ مئوية تحت الصفر وذلك لإجراء القياسات البيوكيميائية الآتية: انزيمات الكبد ( انزيم الالانين امينو ترانسفيريز والاسبرتات امينو ترانسفيريز والجاما جلوتمات) ومستوي الدهون في الدم ( الكوليستيرول الكلي والدهون الثلاثية في الدم).
• عينات الانسجة:
بعد الحصول على الكميات الكافية من الدم، تم ذبح الجرذان وفتح البطن وفصل جزء من الكبد ثم غسلها جيداً بمحلول ملح فسيولوجي (0.9%) ثم وضع جزء من أنسجه الكبد فى ورق فويل وتم الاحتفاظ بها فى المجمد عند درجة حرارة 80˚ تحت الصفر وذلك لطحنهم . وتم طحن هذه الأنسجة بطرق خاصة وذلك بإستخدام هوموجينايزر كهربى ثم فصل العينات بواسطة جهاز الطرد المركزى ثم تجميع الجزء الرائق من السائل ووضعه فى أنابيب معقمة وجافة ثم حفظها فى درجة حرارة 80˚ تحت الصفر لإجراء التحاليل البيوكيميائية عليهم ، وقد إستخدمت هذه العينات فى إجراء القياسات التالي ذكرها.
• عينات الهستوباثولوجى:
بعد 16 إسبوع من بداية التجربةَ تم الفحص بالعين المجردة لكشف أى تغيرات طرأت على أنسجه الكبد لجرذان المجموعات. ثم تم فصل جزء صغير من الكبد وتم حفظها فى محلول فورمالين متعادل 10% ، ثم تم تحضير العينات وصبغها بالصبغات الخاصة ووضعها على الشرائح ووضع الغطاء وتثبيته ، ثم تم فحصها ميكروسكوبياً وتوصيفها وتصويرها عن طريق متخصص فى علم الهستوباثولوجى.