الفهرس 
AbstractOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 324 |  |  |
| | | from | 324 | | |
Abstract
يتميز التوليف البحرى للجزيئات المتناهية فى الصغر (النانونية) المتكونة باستخدام الخلايا الحية (الجزيئات النانونية الخضراء) عن الطرق الكيميائية او الفيزيائية من حيث انها طرق صديقة للبيئة ورخيصة وسريعة ولاتقتضى استخدام مواد كيميائية سامة او ضغط عالى او طاقة او درجات حرارة وتتخلص اهم نتائج الدراسة كالاتى:
اولا:
تم تجميع طحلب الاولفا فاشياتا (احد الطحالب الخضراء) من ساحل البحر الابيض المتوسط خلال عام 2014 وذلك لكثرة توزيعه فى هذه المنطقة وتم نقله الى معمل ابحاث الطحالب بقسم النبات والميكروبيولوجى بكلية العلوم جامعة بنى سويف للتعامل معهم بحيث التعرف والتجفيف وتحضير المستخلصات المختلفة منه وكذلك لتصنيع جزيئات النانو الفضية تحت اشراف اللجنة المعنية بالاشراف على الرسالة.
تم توصيف جزيئات النانو الفضية المتكونة عن طريق الطحلب باستخدام اجهزة الاشعة تحت الحمراء وفوق البنفسجية والجى ماث وجهاز الميكروسكوب الالكترونى. و تميزت جزيئات النانو المصنعة من الطحلب بالاتى:
الثبات العالى لفترة طويلة من الزمن , قصر زمن تصنيعها الذى استغرق اقل من 24 ساعة, صغر حجمها وتنوع اشكالها.
ثانيا:
اجريت التجربة محل الدراسة لإستبيان تاثير الجزيئات الفضية النانونية المستخلصة من طحلب أولفا فاشياتا على الاعراض الجانبية المتسببة نتيجة العلاج بمركب دوكوروبيسين.
دوكسوروبيسين هو دواء مضاد للورم فعال جدا، ولكن إدارتها محدودة بواسطة تعتمد على الجرعة ولكن الدراسات اثبتت أنه سبب اساسى فى اعتلال الكبد والأعضاء الأخرى عند الإنسان وحيوانات التجارب ولقد صممت هذه الدراسة لفحص وتقييم مستخلص الاولفا فاشياتا المعالجة بجزيئات الفضية النانونية فى الوقاية من الإعتلال الكبدى والكلوى والقلبى الناتجيين نتيجة تعاطى الدوكسوروبيسين.
وقد اجريت التجربة بمعمل بيت الحيوان بقسم علم الحيوان بكلية العلوم جامعة بنى سويف على جرذان التجارب بتصريح من وحدة اخلاقيات البحث العلمى بالجامعة باستخدام ورعاية حيوانات التجارب بالكلية.
تم تقسيم مجموعة الحيوانات المستخدمة فى التجربة إلى اربعة مجموعات كالتالى:
المجموعة الأولى (الضابطة): تم تجريعها بالفم الكربوكسي ميثيل سليلوز بتركيز 1% وحقنها بكلوريد الصوديوم بتركيز 0.9% 3 مرات اسبوعيا لمدة ستة اسابيع.
المجموعة الثانية (دوكسوروبيسين): تم تجريعها حقنا بمادة دوكسوروبيسين بجرعة بتركيز 2.5 مجم/كجم وزن الجسم 3 مرات اسبوعيا لمدة ستة أسابيع.
المجموعة الثالثة (دوكسوروبيسين والمعالجة بمستخلص طحلب الاولفا فشياتا): تم تجريعها حقنا بمادة دوكسوروبيسين بجرعة بتركيز 2.5 مجم/كجم وزن الجسم 3 مرات اسبوعيا لمدة ستة أسابيع ويتم تجريعها بالفم أيضا بالاولفا فشياتا بتركيز 100 مجم/كجم وزن الجسم مذاب في الكربوكسي ميثيل سليلوز تركيز 1% 3 مرات اسبوعيا لمدة ستة أسابيع.
المجموعة الخامسة (دوكسوروبيسين والمعالجة بجزيئات النانو الفضية المستخلصة من طحلب الاولفا فشياتا): تم تجريعها حقنا بمادة دوكسوروبيسين بجرعة بتركيز 2.5 مجم/كجم وزن الجسم 3 مرات اسبوعيا لمدة ستة أسابيع ويتم تجريعها بالفم أيضا بجزيئات النانو من الاولفا فشاتا بتركيز 100 مجم/كجم وزن الجسم مذاب فى الكربوكسي ميثيل سليلوز تركيز 1% 3 مرات اسبوعيا لمدة ستة أسابيع.
التحاليل الحيوية الكيميائية:
اولا: تحاليل الكيمياء الحيوية:
عند نهايه الفترة تم ذبح الجرذان الصائمة فى كل المجموعات تحت تاثيرثنائى إيثيل إيثير لأخذ عينات الدم اللازمة وفصلها بجهاز الطرد المركزى لأخذ جزء السيرم لإجراء التحاليل الطبية المختلفة عليه لتعيين التغيرات الكيميائية المصاحبة لوظائف الكبد والكلى والقلب.
بالنسبة للكبد تم تعيين التغيرات الكيميائية المصاحبة لوظائفه مثل الألانين امينو ترانسفيراز (ALT) والفوسفاتيز القلوى (ALP) والجاما جلوتاميل ترانسفيراز (GGT) والالبيومين والبيلوروبين الكلى (total bilirubin) فى السيرم.
وايضا بالنسبة للكلى تم تعيين التغيرات الكيميائية المصاحبة لوظائفه مثل اليوريا و حمض اليوريك والكرياتنين فى السيرم.
واخيرا بالنسبة للقلب تم تعيين التغيرات الكيميائية المصاحبة لوظائفه مثل الأسبرتيت امينو ترنسفيراز (AST) واللاكتيت ديهيدروجسيناز(LDH) والكرياتين كاينيزام بى (CK-MB) فى السيرم. وايضا تم قياس بروانفلامتورى سايتوكاين مثل التيومر نيكروسيس فكتور- ألفا(TNF-α) والانترلوكين فور (IL-4) ودليل اورام مثل الالفا فيتو بروتين (AFP) و سى ايه 19.9 (CA19.9) فى السيرم.
كما تم قياس بعض التعبيرات الجينية مثل .P53 and Bcl2
ثانيا: التحليل الهستوباثولوجى:
تم الحصول على عينات من نسيج الكبد والكلى والقلب للفحص المجهرى البسيط ولقياس الاكسدة الفوقية للدهون (LPO) والجلوتاثيون(GSH) والنشاط الأنزيمى للجلوتاثيون-أس-ترانسفريز (GST) وللجلوتاثيون بيراوكسيديز (Gpx) و للسوبر اوكسيد ديسميوتيز (SOD).
ثالثا: التحاليل الكيمائية الحيوية لمستخلص الطحلب:
كما تم اجراء التحاليل اللازمة للمستخلص الايثانولى للاولفا فشياتا مثل (FT-IR, UV-visible and GC-mass). وايضا اجراء التحاليل اللازمة لمستخلص الاولفا فشياتا المعالج بجزيئات النانو الفضية مثل (TEM).
وقد اظهرت النتائج بعد عمل التحاليل ان مستخلص طحلب الاولفا فشاتا يحتوى على flavonoids, alkaloids, tannins, saponins, phytosterols and phenolic compounds.
وقد أظهرت النتائج أن مادة دوكسوروبيسين تسبب ارتفاع ملحوظ في أنشطة إنزيمات وظائف الكبد ( (total bilirubin, ALT, ALP and GGTمعا مع إنخفاض تركيز الألبيومين فى السيرم. كما تسبب أيضا أرتفاع ملحوظ فى وظائف الكلى والقلب و TNF-αو CA19.9و AFPوانخفاض فى IL-4.
وقد استهدفت هذه الدراسة ايضا الى تقييم تاثير مادة الدوكسكوروبيسين على التعبيرات الجينية لكلا من (p53 and Bcl2)حيث ادت هذه المادة الى زيادة ملحوظة فى معدلات التعبيرات الجينية بينما ادت المعالجة بالمواد قيد الاختيار الى نقص ملحوظ فى معدلات هذه التعبيرات.
تأكدت هذه التغيرات البيوكيميائية الناتجة من معالجة الجرذان بمادة الدوكسوروبيسين من خلال التعديلات الهستوباثولوجية في الكبد حيث أظهر إنتشار تغييرات دهنية، و توسع واحتقان في كل من الأوردة المركزية والبابية وكذلك وجود خلايا التهابية في المنطقة البابية. أيضا تسببت مادة الدوكسوروبيسين فى تسمم كلوى وهذا تم إثباته بالتغيرات التشريحية المتضمنة احتقان فى خصلات كبيبات الكلى وتخثر فى الخلايا الطلائية المبطنة للنُّبَيباتُ الكلوية واحتقان فى الاوعية الدموية فى القشرة بينما وجود نزيف بؤرى فى المنطقة النخاعية. بالأضافة إلى ذلك مادة الدوكسوروبيسين فى المسببة للتسمم القلبى أدت إلى وجود تغيرات تشريحية أيضا فى القلب والتى تضمنت إتساع و إحتقان فى الأوعية الدموية مع وَذَمة ونزيف بؤرى فى العضلة القلبية. وقد وجد ان علاج هذه الحيوانات بالاولفا فاشياتا و جزيئات الفضة النانونية منعت بنجاح معظم هذه التعديلات البيوكيميائية و التشريحية المرضية.
دائما استخدام جزيئات الفضة النانونية المكونة من مستخلص الطحلب الاخضر اثبتت تحسن ملحوظ للتأثير الضار لمادة الدوكسوروبيسين على الاكسدة و نظام الدفاع المضادة للأكسدة. وقد انعكس هذا التحسن من خلال زيادة الجلوتاثيون و الجلوتاثيون-أس-ترانسفيراز والجلوتاثيون اوكسيديز وسوبر اوكسيد ديسميوتيز وانخفاض في بيروكسيد الدهون.
وقد خلصت الدراسة الى الدور الوقائى لمستخلص الاولفا فشياتا وجزيئات النانو الفضية الطحلبية ضد التسمم الكبدى والاعتلال الكلوى والقلبى الناتج عن حقن مادة الدوكسوروبيسين فى الجرذان البيضاء وربما يكون ذلك لكونهما مضادان جيدان للأكسدة حيث أنهم أدوا إلى ارتفاع نسبة مستوى الجلوتاثيون وانشطة الإنزيمات المضادة للاكسدة مثل للجلوتاثيون-أس-ترانسفريز والجلوتاثيون بيراوكسيديز و السوبر اوكسيد ديسميوتيز التى قد يكون لهما دور حيوى فى هذه الوقاية. بالإضافة إلي ذلك فإن التاثير المضاد للإلتهاب والتأثير المضاد للموت المبرمج قد يكون لها دور اساسي ايضا في الوقاية من التسمم الناتج عن دواء الدوكسوروبيسين. ولكى يتم استخدام هذاالمستخلص كدواء للإنسان لابد من دراسات اكلينيكية لتقييم منافعهما واضرارهما فى الإنسان.