الفهرس 
S TEM C ELLSOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 233 |  |  |
| | | from | 233 | | |
Abstract
The implemented flow cytometric protocol for enumeration of CD34+ cells in bone marrow, peripheral, or cord blood, addresses only CD34+ cells, irrespective of their distinct subsets. However, the definition of CD34+ different subsets, has gained importance concerning, the engraftment kinetics and immune reconstitution, after hematopoietic stem cell transplantation. Objectives: This study aimed to describe and enumerate CD34 sub-populations, using a multi-color flow cytometric protocol, based on the expression of CD133, SSEA-4, CD38, and CD10, in an attempt to explore the impact of the different CD34 subsets on engraftment kinetics, patient and graft outcomes. Methods: A total of 33BMT (25 autologous and 8 allogenic) Egyptian patients were included. Detailed demographic, clinical, and laboratory data, as well as echocardiography and pulmonary function tests, were collected from all participants enrolled in the study, before transplantation. All patients were monitored up to 1-year post-transplantation, for the development of complications. Discrimination of the distinct stem cell subsets in the harvest was performed on NAVIOS flow cytometer, using multi-color FCM phenotyping. Results: Seven CD34+ HSC subpopulations were identified in the harvest blood by flow cytometry; the MPP, EMP, BLP, MLP, LMMP, GMP, and the late GMP. The MPP was the most frequently encountered subpopulation, while the BLP was the least encountered one. In addition, the % population and absolute count of the late GMP were significantly higher after autologous transplantation (p=0.049, 0.048 respectively).The absolute count of the MLP was significantly higher after G-CSG + chemotherapy mobilization technique (p=0.039).Higher absolute count of the MLP in the harvest was associated with longer post-transplant 1-year survival of patients (p=0.025). The %population of the GMP in the harvest was significantly correlated with faster engraftment (p=0.039).However, higher proportion of the late GMP (p=0.041,0.028 respectively), along with higher absolute count of the LMPP, have been significantly encountered in patients who developed post-transplant disease relapse (p=0.050).By drawing a ROC curve, only the size of the MPP population at cut-offs of ≤18.85%, and ≤165312, respectively, could be significantly used to predict the persistence of cytopenia at 3 months after transplantation. Conclusion: Our study found that discrimination and quantification of the different CD34 stem cell subsets might play a pivotal role for better understanding of engraftment kinetics and prediction of post-transplant graft and patient outcomes.
الملخص العربي
في الوقت الحاضر، أصبحت زراعة خلايا الدم الجذعية معيار الرعاية لكثير من المرضي الذين يعانون من اضطرابات الدم الخلقية، المكتسبة والخبيثة.
وقد تم تقديم عد الخلايا الجذعية الفرعية المكونة للدم كبروتوكول روتيني من قبل العديد من الدراسات للتمييز بين خلايا الزرع المتوسطة أو رديئة الجودة وبالتالي التنبؤ بالنتيجة بعد الزرع.
الهدف من الدراسة هو قياس وتمييز مختلف انواع الخلايا الجذعية في مرضى زرع النخاع عن طريق إضافة CD10,CD133، وSSEA-4 CD34,CD45علي خلايا ال CD34و ربط تاثير هذه الانواع على كفاءة زرع النخاع وإيجاد ﻋﻼﻗﺔ ﻣﺤﺘﻤﻠﺔ ﺑﯿﻦ انواع الخلايا الجذعية واﻟﺘﻨﺒﺆ ﺑسير عملية زرع النخاع.
تم اجراء هذه الدراسة على 30 مريضًا يخضعون لعملية زرع الخلايا الجذعية من وحدة زرع النخاع، قسم الامراض الباطنية، مستشفيات جامعة عين شمس من المرضى الذين يستوفون المعايير الاهلية لزرع النخاع (زرع النخاع الذاتي او عن طريق متبرع).
تم الحصول على عينات الحصاد بعد الحصول على موافقة اللجنة العلمية والأخلاقية بجامعة عين شمس.
وأظهرت المقارنة بين مختلف مجموعات خلايا الدم الجذعية الفرعية في HSPC فيما يتعلق بالبيانات الديموغرافية للمتبرعين بالحصاد نتائج غير هامة فيما يتعلق بالعمر ومؤشر كتلة الجسم، ومع ذلك وجد أن النسبة المئوية لل EMP أعلى إحصائيا لدى الذكور، ووجد أن النسبة المئوية و العدد الكمي لل GMP أعلى إحصائيا لدى الإناث. وعلاوة على ذلك، النسبة المئوية والعدد الكمي لل Late GMP أعلى إحصائيا مع مرضي زرع النخاع الذاتي، إلى جانب ان العدد الكمي لل MLP كان أعلى إحصائيا في التعبئة مع GCSF + العلاج الكيميائي.
فيما يتعلق بالمقارنة بين مختلف مجموعات خلايا الدم الجذعية الفرعية HSPC فيما يتعلق بالبيانات السريرية بعد زرع، ارتبط انخفاض النسبة المئوية والعدد الكمي لل GMP late بالمضاعفات بعد الزرع (فشل الزرع، رفض الزرع والالتهابات). ومع ذلك، ارتبط ارتفاع النسبة المئوية والعدد الكمي لل Late GMP إلى جانب ارتفاع العدد الكمي للLMPP بشكل كبير بالحالات الإيجابية لانتكاسة مرض ما بعد زرع النخاع. بالإضافة الي أن زيادة العدد الكمي من LMPP جنبا إلى جنب مع ارتفاع النسبة المئوية والعدد الكمي لل GMP ارتبطت بشكل كبير مع مضاعفات ما بعد زرع بشكل عام.
تم إجراء تحليل انحدار لوجستي متعدد المتغيرات للمتنبئات المستقلة لمضاعفات ما بعد الزراعة، والذي أكد نتائج المقارنة السابقة.
أظهر الارتباط بين الخلايا الجذعية الفرعية المختلفة وبين نتيجة صورة الدم في اليوم الأول لثبات الزرع، وصور الدم بعد الزرع، والبقاء على قيد الحياة بعد الزرع لمدة عام واحد، أن النسبة المئوية لل GMP في عينة الحصاد، كانت مرتبطة بشكل كبير مع سرعة ثبات عملية الزرع (p = 0.039).
ارتبط ارتفاع العدد الكمي لل MLP في عينة الحصاد بالبقاء الأطول بعد الزرع لمدة عام واحد للمرضى (p= 0.025).
تم إنشاء منحنى ROC لحساب نقطة قطع لمختلف أنواع الخلايا الجذعية الفرعية، التي يمكنها التنبؤ باختفاء أو استمرار انخفاض خلايا صورة الدم في 1 و 3 أشهر بعد زرع النخاع، أظهرت أن النسبة المئوية و العدد الكمي لل MPP، عند قطع 18.85٪ ≤، ≤165312، على التوالي (AUC: 0.706، 95٪ CI: 0.5-0.864؛ AUC: 0.722, 95٪ CI: 0.518-0.878, على التوالي), يمكن استخدامها بشكل كبير للتنبؤ باستمرار انخفاض خلايا صورة الدم 3 أشهر بعد زرع النخاع ، في حين أن النسبة المئوية و العدد الكمي لبقية أنواع الخلايا الجذعية الفرعية ، تفشل في إظهار أهمية إحصائية للتنبؤ بانخفاض خلايا صورة الدم بعد عملية زرع النخاع.
وأخيرا، من أجل فهم أفضل لعملية زرع الخلايا الجذعية وكذلك حركية ثبات عملية الزرع، قد تكون هناك حاجة إلى مجموعة دراسة أكبر بالإضافة إلى فترة أطول من المتابعة لتقييم أفضل لمضاعفات ما بعد عملية زرع النخاع (على سبيل المثال، 5 سنوات بعد الزراعة).