الفهرس 
IntroductionOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 301 |  |  |
| | | from | 301 | | |
Abstract
عائلة النخيل Arecaceae هي واحدة من أفضل العائلات النباتية المعروفة وتضم 181 جنسا مع حوالي 2600 نوع. تتميز معظم أشجار النخيل بأوراق الخضرة الكبيرة ، والمعروفة باسم السعف. تظهر أشجار النخيل تنوعا هائلا في الخصائص الفيزيائية كما أن لها أهمية اقتصادية وطبية هامة و محاصيل صالحة للأكل و الأطعمة النشوية كما انها مصدر للزيوت و الألياف والخشب. يزرع جنس الليفستونا على نطاق واسع في المناطق الاستوائية باعتباره من أشجار المناظر الطبيعية و هو جنس من 36 نوعا محليا في جنوب و جنوب شرق آسيا وأستراليا والقرن الأفريقي. هناك حوالي أربعة أنواع من الليفستونا في مصر ، وهم ليفيستونا استرلاس و اليفيستونا شينينسيس و ليفيستونا ديسيبينس و ليفيستونا روتونديفوليا. ثلاثة أنواع تنمو في جنوب الصين وتم اختيار ليفيستونا استراليس و ليفيستونا شينينسيس و ليفيستونا ديسيبينس لهذه الدراسة. و قد أظهرت دراسات فيتوكيميائيه عديده أن جنس الليفستونا يحتوي علي بعض مرکبات فلافونيدات و ستيرولات و أحماض أمينية و فيتامينات و أحماض دهنية و فينولات. تهدف هذه الدراسة إلى فصل المكونات الفينولية لأوراق وثمار ليفيستونا استرلاس وتقييم أنشطتها البيولوجية.
هذا العمل يشمل:
• المسح المرجعي للمواد الكيميائية و الفاعليات البيولوجية لأوراق وثمار نبات ليفيستونا استرلاس و ليفيستونا شينينسيس و ليفيستونا ديسيبينس .
• دراسه البصمه الوراثيه لاوراق النبات ليفيستونا استرلاس و ليفيستونا شينينسيس و ليفيستونا ديسيبينس.
• دراسة كيميائيه و استهدفت.
1- المسح الكيميائي الأولى لأوراق وثمار نبات ليفيستونا استرلاس و ليفيستونا شينينسيس و ليفيستونا ديسيبينس.
2- التقدير الكمي للتقييم الغذائي لأوراق و ثمارنبات ليفيستونا أسترلاس.
3- التقدير الكمي لتحليل الأحماض الأمينية لثمار نبات ليفيستونا أسترلاس .
4- تحليل كمي و كيفي للمواد الفينوليه للنباتات الثلاثه : استخدام كروماتوجرافيا السائل فائق التقنية المقترن بطيف الكتله لتقدير المواد الفينوليه للنباتات.
5- التعرف على المستخلصات المحبة للدھون باستخدام كروماتوغرافيا الغاز المقرون بتقدير الكتلة لأوراق وثمار نبات ليفيستونا استرلاس.
6- فصل واستجلاء البنية الكيميائيه للمواد الفينوليه في ثمار نبات ليفيستونا استرلاس .
• دراسة الفاعلية البيولوجية و تشمل:
التأثير المضاد لمكافحة الشيخوخة والتأثير المضاد لمكافحة مرض الزهايمر و التأثير المضاد للالتهابات التأثير الخافض السكر الدم و التأثير المضاد للميكروبات لأوراق وثمار نبات ليفيستونا استرلاس .
التاثير المضاد للفيروسات لاوراق وثمار نبات ليفيستونا ديسيبينس.
دراسة التأثير المضاد للاورام لأوراق وثمار نبات ليفيستونا استرلاس.
تقييم المستقلبات الثانوية لأوراق وثمارنبات ليفيستونا ديسيبينس كمثبطات محتملة لسارس- 2- كوفيد 19 .
الجزء الاول: دراسه البصمه الوراثيه
الجزء الاول : دراسه البصمه الوراثيه لاوراق نباتات ليفيستونا استرلاس و ليفيستونا شينينسيس و ليفيستونا ديسيبينس: تستخدم تقنية SCoT و ISSR على نطاق واسع لتقييم التنوع الجيني للنباتات . و قد تم استخدام عشر فتيلا لإحداث تكبير متعاقب للحامض النووي ثلاث نباتات مع عدد كبير من شرائح متعدده الاشكال و اسفرت النتائج عن: انماط النطاقات التي ينتجها الفتيل ( HB-12) و (SCoT 2)يحدثون اعلى درجه من تعدد الاشكال و شظايا فريده من نوعها لذا يمكن استخدامها في التمييز بين انواع مختلفه من النباتات. انماط النطاقات التي ينتجها الفتيل (HB-15) و (SCoT 6) و(SCoT 8 ) يحدثوا اقل درجه تعدد الاشكال وأعلي نسبه في معامل التشابه , لذا يمكن استعمالها في تحديد النمط الجيني للنباتات.
الجزء الثاني: الدراسة الكيميائية
الفصل الاول: المسح الكيميائي الأولى لأوراق و ثمار نبات ليفيستونا استرلاس و ليفيستونا شينينسيس و ليفيستونا ديسيبينس: کربوهيدرات و جليكوسيدات وفلافونيدات و ستيرولات و تربينات
الفصل الثانى : تعيين المحتوي الكلي من الفينولات و الفلافونويدات:
تم تقدير نسبة المحتوي الكلي للفينولات من خلاصة الكحول المائي من اوراق نبات ليفيستونا استرلاس و ليفيستونا شينينسيس و ليفيستونا ديسيبينس و کانت (78,87± 0,3139) و (19,72± 2.015) و (19,12 ± 0,6004)علي التوالي، بينما كان المحتوي الكلي الفلافونويدات من خلاصة الكحول المائي من اوراق نبات ليفيستونا سترلاس و ليفيستونا شينينسيس و ليفيستونا ديسيبينس وكانت (8,16 ± 0,1906) و( 4,82 ± 0,2214) و(5,48 ±0,05773) علي التوالي.
تم تقدير نسبة المحتوي الكلي للفينولات من خلاصة الكحول المائي من ثمار نبات ليفيستونا استرلاس و ليفيستونا شينينسيس و ليفيستونا ديسيبينس و کانت (32,82 ± 0,7519) و (44,50 ±0,9238) و (70,69 ± 1,732)على التوالي، بينما كان المحتوي الكلي الفلافونويدات من خلاصة الكحول المائي من ثمار نبات ليفيستونا استرلاس و ليفيستونا شينينسيس و ليفيستونا ديسيبينس وكانت (12,81 ± 0,3551) و(17,75 ± 1,039) و(28,51± 0,2946) علي التوالي. بمقارنة النتائج بين ثمار وأوراق ثلاثه أنواع مختلفة من ليفيستونا ، وجد أن الثمار تحتوي على كمية أكبر من محتويات الفلافونويد الكلية والفينولية الكلية مقارنة بأوراق ثلاثه أنواع مختلفة من ليفيستونا.
الفصل الثالث: تقدير للفلافونويدات باستخدام کروماتوجرافيا السائل ذات الأداء العالي المقترن بطيف الكتله.
تم استخدام كروماتوجرافيا السائل ذات الأداء العالي لتعريف المكونات الفينوليه من ليفيستونا استرلاس و ليفيستونا شينينسيس و ليفيستونا ديسيبينس وقد اسفرت التحاليل علي التعرف على إجمالي المركبات في وضع التأين السالب ESI (-) إلى توصيف 65 مركبًا بينما أدى إجمالي المركبات في وضع التأين الإيجابي ESI (+) إلى توصيف 42 مركبًا. في وضع التأين السلبي ESI (-) تم احتواء الأوراق على 24 مركبًا من ليفيستونا استرلاس و 30 مركبًا من ليفيستونا شينينسيس و31 مركبًا من ليفيستونا ديسيبينس ، بينما احتوت االثمار على 45 مركبًا من ليفيستونا استرلاس و42 مركبًا من ليفيستونا شينينسيس و49 مركبات من ليفيستونا ديسيبينس. في وضع التأين الإيجابي ESI (+)، تم احتواء الأوراق على 24 مركبًا من ليفيستونا استرلاس و 19مركبًا من ليفيستونا شينينسيس و22 مركبًا من ليفيستونا ديسيبينس بينما احتوت االثمارعلى 26 مركبًا من ليفيستونا استرلاس و27 مركبًا من ليفيستونا شينينسيس و33 مركبات من ليفيستونا ديسيبينس تم تحديدها مبدئيًا.
الفصل الرابع:1- التقدير الكمي للتقييم الغذائي لأوراق و ثمار نبات ليفيستونا استرلاس.
أظهر تقييم القيم الغذائية أن محتوى البروتين الكلي كان 6,74 ، 5,13 ٪ جم، محتوى الألياف الخام 39,72 ، 22,28 ٪ جم، محتوى الدهون الكلي2,57 و2,93 جم للأوراق والفواكه على التوالي ، و قد قياس خمسة معادن الصوديوم و الكالسيوم و البوتاسيوم والحديد و الفوسفورفي كلا الجهازين ، و قياس أربعة الأفلاتوكسينات ؛ كما تم تحليل بى 1و بى2 و جى1 و جى2، وأظهرت النتائج خلو الأوراق من الأفلاتوكسين. أظهر التحليل الغذائي للأوراق والثمار أنها غنية بفيتامين سي والألياف والمعادن (الصوديوم والفوسفور للأوراق والبوتاسيوم والكالسيوم لثمار) بحيث يمكن استخدامها كمكملات غذائية.
2- التقدير الكمي لتحليل الأحماض الأمينية لثمار نبات ليفيستونا استرلاس.
أوضحت النتائج أن الأحماض الأمينية لثمار أظهرت أن الثمار نبات ليفيستونا أسترلاس كانت غنية بالسيستين (10,21٪) تحتوي على أكبر نسبة من ثمار ليفستونا أستراليس تليها الأسبارتيك (0,51٪) ، الجلوتاميك (0,5٪) ، الجلايسين (0,41٪). ألانين (0,39٪) ، فالين (0,36٪) ، برولين (0,32٪) ، ليسين (0,31٪) ، أرجنين (0,28٪) ، ثيريونين (0,25٪) ، فينيل ألانين (0,24٪) ، تيروسين (0,23٪) ، سيرين ( 0,21٪) ، الايزوليسين (0,2٪) ، هيسيتدين (0,13٪) وأخيراً ميثيونين (0,12٪) يحتوي على أقل نسبة من ثمار ليفيستونا استرلاس.
الفصل الخامس: التعرف على المستخلصات المحبة للدھون باستخدام كروماتوغرافيا الغاز المقرون بتقدير الكتلة لأوراق وثمار نبات ليفيستونا استرلاس
تم تقييم التركيب الكيميائي للكسور المحبة للدهون من الأوراق و الثمار بواسطة كروماتوجرافيا الغاز أظهرت نتائج تحليل الجزء غير قابل للتصبن لأوراق ليفيستونا استرلاس وجود 22 مركبًا ، كان المركب الرئيسي المكتشف هو الفيتول (16,44٪) يليه مشتق الألكان المسمى 2-فينيل ترايديكان(41 ,11%) 1- نوناديسين و1- دوكوسين هما أهم الهيدروكربونات غير المشبعه المكتشف بمساحة5,40٪ و5,25٪ علي التوالي بينما كشفت الثمار عن تحديد 20 مركبًا ، كانت المركبات الرئيسية المكتشفة هي: مكونات الفينول المتطايرة أسيتيل يوجينول (37,58٪) ؛ يليه الأوجينول (29,61٪) ذو النسبة الكبيرة فى الجزء غير المتصبن للاوراق والثمار. أظهرت نتائج الجزء قابل للتصبن( الأحماض الدهنية) لأوراق ليفستونا استرلاس تحديد 26 مركبًا ، كان حمض الهكساديكانويك هو إستر الميثيل الرئيسي للحمض الدهني المشبع من الأحماض الدهنية الرئيسية المكتشفة المشبعة (25,86٪) يليه 9-حمض اوكتاديكانويك (20,34٪) بينما أظهرت ثمار ليفيستونا استرلاس44 مركبًا ، كان حمض أوكتانويك هو إستر الميثيل الرئيسي للحمض الدهني المشبع (33,56٪) يليه7,10- حمض الهكساديكانويك ( 28,06٪) قد تم تقديرھما فى الجزء المتصبن.
الفصل السادس: فصل و استجلاء البنية الكيميائية للمركبات الفينوليه في ثمار نبات ليفيستونا استرلاس:
تم استخلاص ثمار المجففه لنبات ليفيستونا استرلاس باستخدام ۷۰ ٪ كحول ايثيلي، ثم تجزئة هذا المستخلص الكحولي الي مستخلاصات متعاقبه باستخدام الايثر ثم الكلوروفورم ثم البيوتانول الذي تم تمريره بعد تركيزه علي عمود کروماتوجرافي من البولي اميد باستخدام مخلوط من الماء و الكحول الميثيلي بنسب مختلفة. وقد تم التعرف على المواد المفصوله) ستة مركبات) باستخدام الطرق الكيميائية مثل التميؤ الحمضى التام والطرق الفيزيائية المختلفة مثل طيف الكتلة والأشعة فوق البنفسجية والرنين النووي المغناطيسي الهيدروجيني والكربوني، ومقارنتها بما سبق نشره وهذه المواد هي:
Quercetin 3-O-α-D- arabinopyranoside, Vanillic acid, Procatechuic acid, Quercetin 3-O-β-D-galactopyranoside, gallic acid and Dodecanoic acid.
وهذه هي المرة الاولى التي يتم فيها فصل هذه المركبات من نبات ليفيستونا استرلاس.
الجزء الثالث: الدراسه البيولوجيه في المختبر.
الفصل الاول
1-دراسة الفاعلية البيولوجية لاوراق وثمار نبات ليفيستونا استرلاس.
التأثير المضاد لمكافحة الشيخوخة: أظهرت النتائج أن مستخلص أوراق نبات ليفيستونا استرلاس له أقوى تأثير مضاد مكافحة الشيخوخة من مستخلص ثمار نبات ليفيستونا استرلاس ذات تاثير منخفض مقارنة بالدواء المرجعي( الكركمين).
التأثير المضاد لمكافحة مرض الزهايمر: أظهرت النتائج أن مستخلص أوراق نبات ليفيستونا استرلاس له أقوى تأثير لمكافحة مرض الزهايمر مقارنة بالدواء المرجعي.
التأثير الخافض لسكر الدم: أظهرت النتائج أن مستخلص أوراق نبات ليفيستونا استرلاس اكثر المستخلصات تاثيرا خافضا لسكر الدم مقارنة بالدواء المرجعي (سيتجلبتين).
التأثير المضاد للالتهابات: أظهرت النتائج أن مستخلص أوراق نبات ليفيستونا استرلاس انه أكثر فعالية كمضاد للالتهاب وكان نشاطه أقرب إلى الدواء المرجعي (ايببروفن).
التأثير المضادة للميكروبات : تم تقييم النشاط المضاد للفطريات لخلاصه أوراق و ثمار نبات ليفيستونا استرلاس ضد فطرين ممرضين هما اسبريجلس فيوميجاتيس و الكنديده البيكان باستخدام وسط اجار الكيتوكونازول كعقار مضاد للفطريات و وجد ان اوراق نبات ليفيستونا استرلاس لا يوجد لها اي تأثير كمضاد للفطريات بينما الثمار تحتوي علي تاثير ضئيل جدا ومن ناحيه اخري تم تقييم النشاط المضاد للبكتيريا لخلاصه الأوراق والثمار لنبات ليفيستوتا استرلاس ضد نوعين من البكتيريا الموجبة و نوعين من البكتيريا السالبه في وجود عقار الجنتاميسين كعقار مضاد للبكتيريا واسع المجال ووجد ان لخلاصه الأوراق والثمار لها تاثير ضيئل جدا علي البكتيريا الموجبه ( المكورات العنقودية الذهبية و البكتيريا العصيات الرقيقه ) و البكتيريا السالبه (إشريكية قولونية ومتقلبة شائعة).
الفصل الثاني: التأثير المضاد للخلايا السرطانية لأوراق و ثمار نبات ليفيستونا استرلاس :تمت دراسة التأثير المضاد للخلايا السرطانية لأوراق وثمار نبات ليفيستونا استرلاس علي خمس انواع من الخلايا السرطانية؛ سرطان الثدي وسرطان القولون و سرطان الرئة و سرطان العضلات وسرطان الخلايا الليفيه. وقد ثبت أن المستخلص من اوراق ليفيستونا استرلاس أكثر فعالية ضد الخلايا السرطانيه من ثمار نبات ليفيستونا استرلاس.
الفصل الثالث: الالتحام الجزيئي وتقييم المستقلبات الثانوية لأوراق و ثمار نبات ليفيستونا ديسيبينس كمثبطات محتملة لدراسات لسارس-2- كوفيد 19.
اولا: دراسة الالتحام الجزيئي وتقييم المستقلبات الثانوية لأوراق و ثمار نبات ليفيستونا ديسيبينس كمثبطات محتملة لسارس-2- كوفيد 19.
أظهرت نتائج الالتحام المرنة أن الثلاثة فلافونويد جلوكوزيدات أيزوكيرسيتين (-8,2) ، وفيتيكسين (-7,6) ، وإيزورينتين (-7,6) كانت في المرتبة الأولى الروابط تليها خمسة فلافونويد أجليكون مثل تريسين (-6,7) ، كيرسيتين (- 6,4) ، لوتولين (-6,2) ، إبيافزيلشين (-6,2) وكاتشين)-5,8 (يمكن تفسير التقارب العالي لجلوكوزيدات الفلافونويد الثلاثة مع فيروس كوفيد- 19 ( آم برو) من خلال قدرة مجموعة السكريات الخاصة بهم على إجراء تفاعلات قوية مع بعض الأحماض الأمينية الرئيسية.
ثانيا: تقييم تأثير مستخلصات لأوراق وثمار نبات ليفيستونا ديسيبينس على تثبيط إنزيم بروتياز.
تم استخدام مقايسة تثبيط ( ثري ال سي- بروتياز) لتقييم تأثير مستخلصات لأوراق وثمار نبات ليفيستونا ديسيبينس على تثبيط إنزيم بروتياز الرئيسي (آم برو )المسؤول عن تكاثر الفيروس ونسخه وبالتالي يؤثر على فيروس سارس-2- كوفيد 19 البشري .تم تحديد النسبة المئوية لتثبيط تكرار لسارس-2- كوفيد 19 من خلال تقدير تركيز فيروس الحمض النووي الريبوزي( آر إن إيه ) باستخدام اختبار( آر تي - بى سي آر) الكمى ( تفاعل البلمرة المتسلسل في الوقت الحقيقي ( تم استخدام ريمديسيفير كمعيار مرجعي. تم إجراء مقايسة تثبيط الأنزيم البروتيني ( ثري ال سي - بروتياز) كتقييم عملي أولي. أظهر ليفيستونا ديسيبينس تأثيرًا مثبطًا كبيرًا ضد( ثري ال سي بروتياز) 15,58 ± 0,79 و 41,81 ± 2,12 ميكروغرام / مل لمستخلصات الأوراق الثمار . تتوافق هذه النتيجة مع الارتباط المستقر للمركبات (1-12) في موقع الربط لـ( آم برو).
يعد سارس-2- كوفيد 19 العامل المسبب الرئيسي لهجوم جائحة الالتهاب الرئوي كوفيد- 19 الذي ظهر في ووهان. سيؤدي اكتشاف العامل الطبيعي المعروف الذي يمكن أن يمنع الأنزيم البروتيني الرئيسي لسارس-2- كوفيد-19 إلى التحكم في النسخ الفيروسي والتكاثر. تم التعرف على اثني عشر مركبًا معروفًا من المستخلص الكحولي لأوراق ثمار ليفستونا دسبينس باستخدام کروماتوجرافيا السائل ذات الأداء العالي المقترن بطيف الكتله. كانت المكونات الفردية تنتمي إلى عدة فئات بما في ذلك ستة مركبات فلافونويد (خمسة أجليكون وثلاثة جلوكوزيدات) ، أحماض فينولية (اثنان من مشتقات حمض الكافيك وواحد من مشتقات حمض البنزويك) وفينول ميثوكسيل. مكّن تحديد المركبات المشروحة من اختبار العلاقة بين تفاعلاتها مع المستقبلات في موقع ربط( إن ثري) في( آم برو) وهيكلها. في الفحص القائم على هيكل السيليكو ودراسة (ايه دي ام يه) كشفت أن التريسين هو مركب رصاص محتمل مضاد لكوفيد 19 تبين أن المستخلص الكحولي يثبط سارس-2- كوفيد 19من خلال الزرع في المختبر واختبار ( آر تي - بى سي آر) الكمى مع 0,122 و 1.53 ميكروغرام / مل لمستخلصات الأوراق والفواكه ، على التوالي عند مقارنته مع ريمديسيفير كمعيار مرجعي (0,002 ميكروغرام / مل). توفر هذه الدراسة أساسًا علميًا لإثبات الفوائد الصحية لاستخدام نبات ليفيستونا ديسيبينس و المطلوب اختبار في الجسم الحي للتحقق من التأثير الملحوظ للمواد الكيميائية النباتية النشطة.