Search In this Thesis
   Search In this Thesis  
العنوان
Microbiological and biochemical studies on production of exopolysaccharides as an anti-inflammatory agent from marine bacteria /
المؤلف
Ali, Esraa Gamal Abd-Elnasser Omar.
هيئة الاعداد
باحث / إسراء جمال عبد الناصر عمر على
مشرف / صباح أبو المعاطى أحمد
مشرف / محمد السيد محمد العوضي
مناقش / مرفت جميل حسن حسن
مناقش / سحر صالح محمد
الموضوع
botany.
تاريخ النشر
2022.
عدد الصفحات
144 p. :
اللغة
الإنجليزية
الدرجة
ماجستير
التخصص
علوم النبات
تاريخ الإجازة
1/1/2022
مكان الإجازة
جامعة بنها - كلية العلوم - الميكروبيولوجي
الفهرس
Only 14 pages are availabe for public view

from 207

from 207

Abstract

تعتبر المنتجات الطبیعیة ھي المركبات التي تنتج بواسطة الكائنات الحیة والتي غالباً ما یكون لھا أثر حیوي أو دوائي لذلك فھي تستخدم في اكتشاف وتركیب الأدویة والعقاقیر. تعد السكريات المتعددة المنتجة من الكائنات الحية البحرية واحدة من المنتجات الطبيعية التى تم إستخدامها فى العديد من مجالات المواد الحيوية والغذاء ومستحضرات التجميل والصيدلة.
على وجه الخصوص، تم الكشف عن العديد من الخصائص الدوائية للسكريات البحرية مثل مضادات الأكسدة، ومضادات الالتهابات، ومضادات الأورام، ومضادات السمنة، ومضادات السكري، ومضادات التخثر، والمضادات للفيروسات، والمناعة، والوقاية من أمراض القلب ، ومضادات الكبد، ومضادات التهاب الكبد.
فى ظل البحث المستمر من العلماء لإیجاد مواد مضادة للالتهابات اكثر أماناً وخاصة من مصادر طبیعیة كان الاتجاة في ھذه الدراسه نحو انتاج سكریات عدیدة من بعض البكتریا البحریة من البحر الأحمر(رأس سدر والغردقه) فى مصر نظراً للظروف الصعبة والمعقدة التي تعیش فیھا الكائنات الحیة في ھذا البحر لما لھا من صفات متمیزه تنعكس بالتالى على انشطتھا البیولوجیه.
السكریات العدیده المستخلصة من مصادر بحریة تمتاز بقدرتھا البیولوجیة العالیه كمضادات للأكسده ومضادات للإلتهابات ومنشطة للجھاز المناعي والتى تعزى الى تمیزھا فى التركیب الكیمیائى والشكل الفراغى. لذا كان الإتجاه نحو عزل أنواع مختلفة من البكتریا القادرة على إنتاج سكریات عدیدة وفصلھا ومعرفة الظروف المثلى اللازمه لنمو البكتریا لإنتاج ھذه السكریات والتعرف على تركیبھا الكیمیائى والتقییم الأمثل لھذة السكریات كمضادات للالتهاب.
تمت ھذه الدراسه عن طریق تجمیع عیناتِ من مناطق مختلفة من البحر الأحمر(راس سدر و الغردقه). وقد تم استخدام طریقة التخفیف المتتابع للعزل بواسطة بیئات العزل المختلفة لعزل وتنقیة كائنات البكتریا المختلفة وذلك حتى یمكن إستخدامھا فى صوره نقیة. وقد وصل عدد العزلات التي تم عزلھا 12عزله بكتیریه.
تم إختبار قدرة ھذه العزلات علي إنتاج سكریات عدیده وتقییم ھذه السكریات العدیده كمضادات للأكسده عند أزمنة مختلفة ومن ثم؛ تم إختیار افضل عزله من العزلات ذات الإنتاجیة الأعلى للمركبات المضادة للأكسدة والتي خضعت بدورھا لدراسات مورفولوجیة وفسیولوجیة وكیموحیویة للتعرف على ھذه العزلات من الناحیة التقسیمیة . وتم استخدام الطرق الجزیئیه 16SrRNA لتعریف أفضل ھذه العزلات وكان تعریفة Pontibacter Sp. MSE 2022 وكان رقم انضمامة لبنك الجینات ھو. ON479824
تم دراسة الظروف البیئیة والغذائیة المثلى لإنتاج السكر العدید من السلاله المُعرفه وكانت عباره عن ثلاثه أیام تحضین للبكتریا فهي أفضل فترة لإنتاج أفضل كمیة من السكر العدید، أما الأس الھیدروجیني فكان 7 وكانت درجة الحراره المثلى ھي 40oC أما التھویة فكانت الافضل عند rpm 120. وحجم المیكروب اللازم لإنتاج أفضل سكر عدید 750 میكرو مل لكل 50 مل وكان افضل مصدر للنيتروجين هو الببتون بينما افضل مصدر للكربون هو السكروز عندما كان بتركيز 20 جم/مللتر.
وتم زراعة السلالة المُعرفة وفصل وتنقیه عدة أجزاء من السكر العدید بواسطة الترسیب بالایثانول وكان الجزء الأكبر ھو ما تم فصلة بواسطة ثلاثه أحجام من الایثانول وتم تسمیتھا (EPSES12) ومن ثم تم تعرضھا لقیاس بعض الأنشطة مثل مضادات الأكسدة و مضادات الألتهابات. حیث وجد أن أفضل تركیزمضاد للأكسدة بواسطة الـ DPPH للمركب كان 98.39% عند 1 مللى جرام/مللي وذلك بعد 120 دقیقة. وبواسطه H2O2 كانت IC50 100 µg/ml بعد 30 min. و بواسطه (RP) كانت اقصى فعاليه عند 1000 ميكرو/ميللى و بواسطه ABTS اظهرت فعالية عالية عند تركيز قليل 100 ميكرو/مللى (52.89%) وزادت تدريجيا الى (97.98%) بزياده التركيز الى 1000 ميكرو/مللى
وجد ان هذا السكر العديد هو سكر غير متجانس يتكون من سكريات احاديه مختلفه هى جلاكتويورنيك و جالكتوز واربينوز بنسبه 1.1 : 5.1 : 2.3 بالتوالي وتم تقدير نسبة كلا من حمض اليورونيك و السلفات فى السكر العديد ووجد انهما (14.45mg/ml) , (9.08 mg/ml) بالتتابع. أما الأشعة تحت الحمراء اثبتت أنه یحتوي علي مجموعات وظیفیة معینة منھا H–O و H–C و O-C و COO- ووجد أن الرابطة الجلیكوسیدیة من السكریات الأحادیة من النوع بیتا.
يعتبر افراز البروستاجلاندينات صفة مميزة لأمراض الالتهابات المختلفة حيث يتم انتاجها كرد فعل طبيعى لعمل انزيمات السيكلواكسوجينيزو على حامض الارشيدونيك ويتواجد الانزيم فى صورتين سيكلوجينيز1&2 تم التركيز فى هذه الدراسة على تقيم دور السكر العديد المنتج من البكتريا كمضاد للالتهابات وتأثيرة على انزيم السيكلوجينيز2 و الليبوكسيجينيز وقد وجد أن السكر العديد ثبط كلا من LOX بنسبه 88.56% وكانت لهIC50= 15.66 ±1.12 و انزيم COX2 بنسبة 75.41% وكانت له IC50= 28.50± 1.15 وتم عمل اختبار in vitro بواسطه plasma membrane وحساب نسبة تثبيط تحلل كرات الدم الحمراء وكانت أقصى نسبه تثبيط هى 75.8% ± 0.004 عند تركيز 1 مللى جرام / مللى.