الفهرس 
IntroductionOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 123 |  |  |
| | | from | 123 | | |
Abstract
”يعتبر البكتين واحد من أكثر المركبات الطبيعية إنتشارا حيث يدخل البكتين في تركيب جدر الخلايا النباتية, البكتين عبارة عن مركب معقد من السكريات العديدة و تكون الوحدة الأساسية له مادة الجلاكتورونان و تم تخطيط هذه الدراسة لعزل مجموعة من الفطريات لها القدرة علي تكسير البكتين و إنتاج إنزيم البكتينيز الذي له استخدامات و تطبيقات صناعية عديدة وتعتبر إنزيمات البكتينيز من الإنزيمات الهامة صناعيا, وترجع أهميه هذه الانزيمات إلى استخدامها في عدة صناعات خصوصا في استخلاص عصائر الفواكه والخضروات, صناعة الورق والنسيج, تخمرات الشاي والبن, استخلاص الزيوت,ازاله الصمغ من الألياف النباتية و معاملة مخلفات مياه المصانع المحتوية على المواد البكتينيه. وتعد الكائنات الحية الدقيقة وخاصة الفطريات ذات أهمية كبيرة من الناحية الاقتصادية لإنتاج تلك الإنزيمات على النطاق التجاري. وقد تناولت هذه الدراسة عزل وفحص بعض سلالات الفطريات من مصادر مختلفه من ترب الموالح المصريه واختبار مدى كفاءة تلك العزلات في انتاج انزيمات البكتينيزوتعريفها ثم استخدام اكثر الفطريات المعزولة كفاءة في إنتاج البكتينيز وفحص تأثير المكونات الفيزيائية والكيميائية للوسط لمعرفة المنشطات والمثبطات لزيادة إنتاجية الإنزيم. و من ثم تجربه هذا الإنزيم علي نباتي الترمس و الذره وتقييم تأثيرنقع بذورالترمس و حبوب الذره و اختبار قدره الأنزيم في التأثيرعلي الصفات المورفولوجية والفسيولوجية للنباتين في مظاهر نمو المجموع الجذري والمجموع الخضري و محتوي الأصباغ ( كلورفيل (أ)، كلورفيل(ب) والكاروتين) وبعض المركبات الأيضية للنباتين المستخدمين. وفيما يلى ملخص النتائج المتحصل عليها: تم عزل ثمانون عزلة فطرية واختبار قدرتها على تحليل البكتين و تبين وجود خمسه وثلاثون عزلة منها لها القدرة على إنتاج إنزيمات البكتينيز تم تعريف العزلات الموجبه لانتاج الانزيم فوجد انها تصنف الي خمسة وثلاثين نوعًا ينتمي إلى ثلاثين جنسًا وهي ألتيرناريا ، فوزاريوم، تريكوديرما، إيبيكوكوم، أسبيرجيلوس، كننغهاميلا، كيتوميوم، كوشلوبلوس، بنيسيليوم، فيوزاريوم، ترايكوديرما ، ونوع واحد ينتمي إلى الفطريات العقيمه. تم التعريف بناءً على الخصائص الميكروسكوبية والماكروسكوبية مثل لون الثقلة، والهيفية، والبوغة، والهياكل الجنسية وغير الجنسية. تم عمل اختبارأولي (كيفي) لمعرفه قدره الفطريات علي إنتاج البكتينيز من عدمه. تم إنتاج إنزيم البكتينيز من ثلاثة عشر فطراً مختلفاً تم عزلها من تربة الموالح في مصر،و هي ألتيرناريا ألتيرناتا، أسبرجيلوس كارنيوس، أسبرجيلوس فلافوس، أسبرجيلوس نايجر، أسبرجيلوس تيريوس، كنينغهاميلا إليغانز، كيتوميوم sp، كوشيلوبلوس sp، فوزاريوم أفيناسيوم، فوزاريوم كولموروم، بنيسيليوم سيترينوم، تريكوديرما هارزيانوم، وإبيكوكوم نيجروم لإنتاج إنزيم البكتينيز على وسط البكتين الحامضي بواسطة التخمر الغمري. تم عمل إختبار كمي لتحديد أعلي الكائنات أنتاجا للإنزيم و لُوحظ أن الأسبيرجيلوس كارنيوس CBS NG096171.1 أنتج أقصى إنتاج لإنزيم البكتينز ويليه أسبرجيلوس تيريوس EFBL-CC OQ642314.1. تم تعريف الفطريات الأعلي إنتاجاً للبكتينيز جزئيا طبقا لتتابع القواعد النيتروجينية في حمض DNA الريبوسومي (ITS)، باستخدام تقنية جهاز تسلسل البلمرة، تم تأكيد الأصناف أسبرجيلوس كارنيوس CBS و أسبرجيلوس تيريوس EFBL-CC جزيئيًا بناءً على تسلسلات ITS، وتم إيداع تسلسلاتهم في Genbank بأرقام الوصول NG096171.1 و OQ642314.1. تم تنفيذ تحسين أولي للمعاملات الفيزيائية والكيميائية مثل وقت التخمر ودرجة حرارة التحضين والرقم الهيدروجيني الأولي للحصول على الإنتاج الأقصى لإنزيم البكتينيز. تم أيضًا تحسين المعاملات التغذوية مثل الكربون والنيتروجين وتركيز المادة الخام للحصول على إنتاج أفضل لإنزيم البكتينيز. بالنسبة لـ الأسبيرجيلوس كارنيوس ، تم استخدام الفركتوز كمصدر للكربون، و NH₄Cl كمصدر للنيتروجين، و 2% من البكتين الحمضي، ودرجة حرارة (21.5-30 درجة مئوية) ، ورقم هيدروجيني (6-7.8)، وزمن (4-6) أيام، بينما لـ A. terreus، تم استخدام اللاكتوز كمصدر للكربون، واليوريا كمصدر للنيتروجين، و 1.5% من البكتين الحمضي، ودرجة حرارة (21.5-30 درجة مئوية) ، ورقم هيدروجيني (5-7) ، وزمن (5-6.5) أيام، حيث أظهرت تأثيرًا كبيرًا على إنتاج إنزيم البكتينيز. تم إجراء تجربة باستخدام التركيب أعلاه للوسط مع المعاملات الأمثل وأعطت إنتاجًا لإنزيم البكتينيز قدره 13121.7 وحدة/مل لـ الأسبيرجيلوس كارنيوس و 11391.5 وحدة/مل لـ أسبرجيلوس تيريوس على التوالي، مما يعادل زيادة بنسبة 52% مقارنة بما تم الحصول عليه قبل التحسين. وبالتالي، تمكنت الدراسة الحالية من الحصول على الحد الأقصى لإنتاج إنزيم البكتينيز من نفايات الحمضيات عن طريق الأسبيرجيلوس كارنيوس CBS NG096171.1، مما يمهد الطريق لاستخدام النفايات الزراعية لإنتاج منتجات مضافة القيمة والحفاظ على البيئة نظيفة وخضراء. تم إنتاج إنزيم البيكتينيز الجديد من فطر الأسبيرجيلوس كارنيوس CBS NG096171.1، ومع دور الإنزيمات والمركبات الأيضية الفطرية في تعزيز نمو النبات، أدى إلى إجراء تجربة باستخدام تراكيز مختلفة من الإنزيم الخام والمنقى جزئياً على نباتين هما الترمس Lupinus termis و الذره Zea mays، وُجد تأثير الإنزيم المنقي جزئيا بنسبة ٥٠٪ يحسن من نمو الترمس بشكل طفيف Lupinus termis و بينما يحسن نمو نبات الذره بشكل ملحوظ جدا Zea mays ويعزز معايير النمو عند مقارنة النباتات المعاملة بالنباتات الغير معامله ، بينما يعيق الإنزيم الخام بنسبة ١٠٠٪ نمو نبات الترمس مقارنة بالنباتات الغير معامله. مما سبق ، يُستنتج أن مجال استخدام المركبات الأيضيه الأوليه أو الثانويه للكائنات الدقيقة قد قدم معلومات كبيرة وفوائد للزراعة ومجالات أخرى ولكن لا يزال لديه الكثير ليقدمه. الفطريات هي مصانع كيميائية رائعة وستعزز بشكل كبير من الإنتاجية الزراعية. لم يتم بعد استخدامها لتعزيز نمو النباتات في الزراعة على نطاق الإنتاج ويجب أن يُتابع هذا المجال. إنها قادرة على إنتاج مجموعة واسعة من المركبات التي تختلف اعتمادًا على الظروف: درجة الحرارة، ومحتوى ونوع المغذيات، والرطوبة، والتنافس، وغيرها. بالإضافة إلى ذلك، فإن نقع بذورالترمس وحبوب الذرة سواءاً في الإنزيم الخام أو المنقي جزئياً من الأسبيرجيلوس كارنيوس CBS NG096171.1 (خاصةً التركيز المستخدم الأقل؛ ٥٠٪) يعزز نمو وأيض النباتين المستخدمين. علاوة على ذلك، كانت استجابة الذرة أكثر تميزاً من استجابة الترمس ويمكن أن يكون ذلك بسبب أن الذرة نبات تمتص ضوء الشمس بنظام .C4”