الفهرس 
IntroductionOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 230 |  |  |
| | | from | 230 | | |
Abstract
تعتبر القواقع العائل الوسيط لكثير من الطفيليات التي تسبب أمراضاً للإنسان والحيوان، وقد اتخذت وسائل مقاومة تلك الأمراض طرقاً شتى، كان من أهمها استخدام المبيدات للقضاء على هذه القواقع غير أنه سرعان ما اكتسبت هذه القواقع مناعة أو مقاومة ضد هذه المبيدات. لذلك فإن معرفة وسائل مقاومة القواقع لهذه المركبات سوف يساعد في وضع البرامج السليمة للقضاء عليها، ويعتبر الجلوتاثيون وإنزيمات معادلة السمية من هذه الوسائل وذلك لدورها الهام في حماية الكائنات الحية عن طريق معادلة سمية المواد الكيميائية السامة والغريبة. ولذلك فإن الهدف من هذه الرسالة هو دراسة مستوى الجلوتاثيون وإنزيمات معادلة السمية بالإضافة إلى تنقية ودراسة الخواص الكيميائية والفيزيائية لإنزيم الجلوتاثيون ترانسفيريز في قوقع البولينس ترانكاتس العائل الوسيط لطفيل البلهارسيا.
حيث تم تقدير مستوى الجلوتاثيون في أنسجة القوقع مسجلاً 233 نانومول/جرام نسيج، بينما كان نشاط الجلوتاثيون ترانسفيريز والجلوتاثيون ردكتيز والجلوتاثيون بيروكسيديز والكتاليز 88 و27 و11 و3 × 310 نانومول/دقيقة/مج بروتين على الترتيب.وبدراسة تأثير النيكلوزاميد على الإنزيمات المضادة للأكسدة في قواقع البولينس ترنكاتس، وجد أن زيادة نشاط الإنزيمات يؤدي إلى زيادة مقاومة القوقع للمبيد وتثبيطها يؤدي لموت القوقع.
إيضاً تم استتباب طريقة سهلة لتنقية أيزوإنزيمات الجلوتاثيون ترانسفيريز من قوقع البولينس ترانكاتس، وذلك باستخدام الفصل الكروماتوجرافي على عمود ثنائي إيثيل أمينو إيثيل سيفاروز متبوعاً بالفصل الكروماتوجرافي على عمود الجلوتاثيون سيفاروز. وقد أوضح الفصل الكروماتوجرافي للمستخلص الخام لأنسجة قوقع البولينس ترانكاتس على عمود ثنائي إيثيل أمينو إيثيل سيفاروز وجود أربعة من أشكال الجلوتاثيون ترانسفيريز. وقد تم استخلاص الأيزوإنزيمين الرئيسيين (GST2 و GST3) باستخدام تركيزي 65 و 130 نانومولار من كلوريد الصوديوم واستعادتهما بنسبة 24.6% و 60.9% على الترتيب، بينما تم استخلاص أيزوإنزيمين آخرين (GST1 وGST4 ) باستخدام تركيزي 50 و 200 نانومولار من كلوريد الصوديوم على الترتيب، واستعادتها بنسبة 7.7 % لكل منهما. وقد تم تنقية أيزوإنزيمي GST2 و GST3 إلى درجة التجانس باستخدام الفصل الكروماتوجرافي على عمود الجلوتاثيون سيفاروز، وبلغ النشاط النوعي لهما12.4 و 23.2 ميكرومول/دقيقة/ مليجرام بروتين وتضاعفت درجة النقاوة 86.7 و 162.2 مره، على الترتيب.
كما تم تقدير الوزن الجزيئي لأيزوإنزيمي GST2 و GST3 بواسطة الفصل الكهربي على جل البولي أكريلاميد المحتوي على كبريتات دوديسيل الصوديوم بحوالي 23.6 كيلودالتون، لكل منهما. كما وجد أن رقم الأس الهيدروجيني لنقطة التعادل الكهربي لأيزوإنزيم GST2 عند 4.33 و4.37 و4.40 بينما وُجد رقم الأس الهيدروجيني لأيزوإنزيم GST3 عند 4.23 و 4.28.
بدراسة تأثير الأس الهيدروجيني على نشاط الإنزيم وجد أن أعلى نشاط يكون عند الأس الهيدروجيني 6.5 لأيزوإنزبمي GST2 و GST3. وبدراسة تأثير درجة الحرارة على GST2 وجد أن درجة الحرارة المُثلى تكون عند درجة 46 درجة مئوية. وتم تقدير ثابت أرهنيس ووجد أنه يساوي 1.826 كيلوكالوري. بينما درجة الحرارة المُثلى لأيزوإنزيم GST3 53.5 درجة مئوية ووجد أن ثابت أرهينيس يساوي 3.435 كيلو كالوري.