Search In this Thesis
   Search In this Thesis  
العنوان
Biotechnological and molecular biologic studies on the production of antibiotics from actinobacteria /
المؤلف
El-shobaky, Ahmed Mohamed Ibrahim.
هيئة الاعداد
باحث / Ahmed Mohamed Ibrahim El-shobaky
مشرف / Fathy Awwad Mansour
مشرف / Omar Abd El-Samei El-shahaby
مشرف / El-sayyed El-sayyed Havez
مشرف / Mohamed Ismail Abo Doubara
الموضوع
Actinomycetales.
تاريخ النشر
2010.
عدد الصفحات
166 p. :
اللغة
الإنجليزية
الدرجة
الدكتوراه
التخصص
علوم النبات
تاريخ الإجازة
1/1/2010
مكان الإجازة
جامعة المنصورة - كلية العلوم - Department of Botany
الفهرس
Only 14 pages are availabe for public view

from 193

from 193

Abstract

يهدف هذا البحث نحو دراسة الأنشطة الضد أحيائية والبيوكيميائية والفسيولوجية لبعض الأكتينوميسيتات , وقد تم دراسة القدرات الضد أحيائية لـ 109 من الكائنات مستخدمة عدد كبيرا من الكائنات المختبرة وتشمل البكتيريا والخمائر والفطريات. تم اختيار 11 عزلة ذات نشاط ضد ميكروبى واضح ومميز تجاه الكائنات الاختبارية (البكتريا والفطريات والخمائر) وقد تمت دراسة مقدرة هذه المعزولات من حيث قدرتها على إنتاج المضادات الحيوية عند تنميتها على بيئات غذائية. ولقد تم تعريف الـ 11 عزلة باستخدام طرق الهندسة الوراثية والبيولوجيا الجزيئية مثل التكبير العشوائى للحامض النووى (RAPD-PCR) باستخدام 6 من البادئات (primers) و ال RFLP (تعدد الأشكال المظهرية فى الجين) باستخدام مجموعة من إنزيمات القطع وتحديد تتابعات القواعد النيتروجينية للجين باستخدام تفاعل إنزيم البلمرة المتسلسل ثم تكبير هذا الجين باستخدام اثنين من البادئات ثم عرفت تتابعات النيوكليوتيدات لهذا الجين وبعد مقارنتها بقواعد البيانات فى بنك الجينات على شبكة الإنترنت باستخدام برنامج CLUSTALW. ثم تم اختيار العزلة (1) (ستربتوميسيس) AEFO1 HM775972.1G:302495615 للدراسة لقدرتها الملحوظة على النشاط الضد ميكروبى ومن ثم إنتاج المضاد الحيوى. ثم تم عمل استخلاص للبلازميد لتحديد الجين المسئول على إنتاج المضاد الحيوى وتم عزل شكلين مختلفين من البلازميد (750 , 10000 b.p) وعمل تفاعل transformation فى DH5 E. coli ثم تم إختبار الخلايا المحولة مباشرة بتنميتها على وسط غذائى فقير مضاف إليه المضاد الحيوى وخلايا الـ E. coli المحولة التى استطاعت النمو قد تكون نتيجة لاكتساب جينات المضاد الحيوى. لذا فيوجد نسبة تعكير للبيئة. اختيرت السلالة رقم 1 ستربتوميسس HM775972.1G:302495615 AEFO1 وتم استخلاص المضادالحيوى المنج بهذه السلالة بواسطة البيوتانول عند الرقم الأيدروجينى 7 ، وتم تنقيته باستخدام كروماتوغرافيا الورق وكروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة ، وأمكن الحصول على ذلك المضاد الحيوى على هيئة مسحوق أحمر قرمزى. أختبرت القدرة الضد أحيائية لهذه المادة باستخدام طريقة الأقراص المشبعة وباستخدام الكروماتوغرافيا الحيوية الذاتية (بيواوتوغرافيا) فأبدت قدرة ضد أحيائية عالية تجاه البكتريا الموجبة والسالبة لصبغة جرام والخمائر والفطريات. درست الخواص الكيموفيزيائية (الاختبارات اللونية ، المجموعات الفعالة ، الأشعة فوق البنفسجية UV ، الأشعة تحت الحمراء IR ، الرنين النووى المغناطيسى NMR ، طيف الكتلة (mass spectrum) لهذه المادة النقية (أحمر قرمزى اللون). وبناء على نتائج هذه الدراسة فقد تم تعريف المضاد الحيويى على أنه نوع جديد من المضادات الحيوية.